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生化考研重点知识总结 第一章 单糖 ①多糖与碘显色，至少需要的葡萄糖残基数：6 ②唾液淀粉酶激活剂：Cl- ③几个典型非还原糖：蔗糖、糖原、淀粉 ④形成N-糖肽键的单糖或衍生物是： 第二章 油脂 ①几个非饱和脂肪酸双键数： ⑴油酸：1 ⑵亚油酸：2 ⑶亚麻酸：3 ②人不能自身合成的必须脂肪酸： 亚油酸、亚麻酸 ③四种脂类转运脂蛋白： ⑴CM：乳糜微粒，转运外源性三酰甘油酯 ⑵VLDL：极低密度脂蛋白，转运内源性三酰甘 油酯 ⑶LDL：低密度脂蛋白，转运内源性胆固醇 ⑷HDL：高密度脂蛋白，转运外源性胆固醇 第三章 氨基酸与蛋白质 ①几种主要氨基酸及三字母缩写 ⑴两特殊：Pro、Gly ⑵芳香：酪（Tyr）色（Trp/Try，吸光最强）苯（Phe） ⑶八种必需氨基酸：甲携来一本亮色书，Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr ⑷侧链为羟基氨基酸：苏（Thr）丝（Ser）酪（Tyr） ⑸酸性氨基酸：天（Asp）谷（Glu）※对应两酰胺：Asn、Gln ⑹碱性氨基酸：赖（Lys）精（Arg）组（His） ⑺其它：丙氨酸（Ala） ②PI ⑴PI的计算：PI=（PK1+PK2）/2=(PK1+PKRCOOH)/2=(PK2+PKRNH2)/2 ⑵PH的计算：PH=PK1+Lg（R/R+）=PK2+Lg（R-/R） ⑶PH =7的水中溶蛋白，PH=6，则该蛋白PI6：蛋白溶后PH下降为6，表明蛋白的COOH电离出H+，则产生了R-，PH=6PI 时有R- ③蛋白二级结构 ⑴α螺旋：Sn=3.613，存在Pro时不形成α螺旋，右手螺旋 ⑵β折叠：同/反向，肽键中H与O成氢键，轴距0.35nm ⑶β转角：转角处为Gly ④超二级结构：无规卷曲、结构域 ⑤三级结构：作用力（二硫键、疏水作用力、氢键、静电离子键、范德华力） ⑥蛋白结构分析 ⑴N端分析法：FDNB（Sanger）、PITC（Edman）、DNS-Cl（丹磺酰氯）、氨肽酶法 ⑵C端分析法：羧肽酶法、无水肼解法 ※羧肽酶A：不能水解C端为Lys、Arg、Pro的肽键；羧肽酶B：能水解C端为Lys、Arg的肽键；C端倒数第二位是Pro时，A、B都不能水解 ⑶打开二硫键：还原法（巯基化合物，碘乙酸保护）、氧化法（过甲酸） ⑷专一切断：胰蛋白酶（Lys、Arg-COOH肽键）；CNBr（Met-COOH肽键）；胰凝乳蛋白酶（）； ⑦显色反应 ⑴Follin酚：蓝色，酚基（Tyr）、吲哚基（Trp），组分（CuSO4+磷钼酸） ⑵Millon：红色，酚基（Tyr），组分（HgNO3+Hg（NO3）2） ⑶坂口反应：红色，胍基（Arg），组分（α萘酚，NaClO） ⑷黄色反应：黄色，芳香氨基酸，组分（浓HNO3） ⑸双缩脲反应：紫红色，肽键，多肽，组分（NaOH+CuSO4） ⑹乙醛酸反应：紫色，吲哚基（Trp） ⑧几种重要氨基酸 ⑴提供活性甲基的：S-腺苷Met ⑵形成N-糖肽键的：Asp ⑶胶原蛋白中含量高的氨基酸：Gly、Ala、Pro、HO-Pro、HO-Lys ⑨蛋白分离纯化技术：透析、超滤；密度梯度离心；凝胶过滤；PI法、盐析、有机溶剂法；电泳、离子交换；吸附层析；亲和层析 ※凝胶过滤大分子先出，凝胶电泳相反：机理 △分子运动速度决定因素：大小、电荷量、形状 ※蛋白离子交换层析与洗脱： ※凝胶电泳三效应：电荷、分子筛、浓度效应 ⑩蛋白含量测定 ⑴测N：凯氏定氮、紫外吸光、双缩脲吸光、福林酚显色吸光 ⑵测M：沉降离心、凝胶过滤（凝胶排阻层析）、SDS ※凯氏定氮：HNO2反应，生成的N2中氨基酸占1/2 ⑾其它 ⑴分离二硫基的肽段可用：SDS ⑵几个主要氨基酸的PI值： ⑶几种重要蛋白： ⑷镰刀贫血病：Glu→Val，第6位 ⑸与烷化剂（碘乙酸）反应的氨基酸：Cys（半胱氨酸） 第四章 酶学 ①酶活化中心组成：结合部位、催化部位 ②计算：活力单位（IU、Kat）、比活力（IU/mg）、转化数/转化周期、米氏方程 ③各可逆抑制作用的动力学特点：Km、Vmax ※几个抑制作用：竞争抑制（丙二酸对琥珀酸脱氢酶）；有有机磷（与丝氨酸羟基共价不可逆）；CO、CN（作用于Cytaa3）；不可逆抑制（重金属、有机砷、CN化物、硫化物、CO） ④酶促反应初速度与[E]、T有关 ⑤以“三点结合”模型作用的酶：甘油激酶 ⑥酶的专一性 ⑴专一水解葡萄糖形成的二酯键的酶： ⑵以O2为直接氢受体的氧化酶：VC氧化酶、细胞色素氧化酶 ⑦别构酶 ⑴两独立功能部位：活性中心、变构中心 ⑵动力学曲线：S型，其它为双曲线 ⑶具有效应：协同效应、变构效应 ※典型代表—血红蛋白：协同效应、波尔效应、变构效应 ⑧酶分离纯化 ⑴要求：纯化倍数高、回收率高 ※纯化倍数=比