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一、孟德尔学说奠定了遗传学 基础 孟德尔(1822-1884)从 1856 年起开始豌豆试验。 孟德尔的基本方法是杂交。他挑选了七对性状。 经过近 10 年的潜心研究,孟德尔发表了他的研究报告。其内容可概括两个定律。 1、孟德尔第一定律--分离律 2、孟德尔第二定律--自由组合律 3、孟德尔学说的要点 当一株植株中控制某一对性状的一对遗传因子均为隐性因子时,该植株才表现出隐性性状(如白花或绿色豆粒)。其他情况下,包括一对遗传因子均为显性,或一个显性一个隐性,均表现出显性性状(如紫花或黄色豆粒)。这一点在分离律实验中看的很清楚。 当两对性状一起加以研究时,显性和隐性的基本规律仍与上面相同,但要加上一条, 控制不同性状的遗传因子,在传代中各自独立,互不干扰,出现自由组合现象。 4、孟德尔学说的重要意义 ? 大多数生物体通常由 一对遗传因 子(后来称为两个等位基因)控 制同一性状。这样的生物体称为 2n 个体。? 遗传因子可以区分为显性和隐性。? 控制不同性状的遗传因子是各自 独立的。 (2)孟德尔提出了杂交、自交、回交等一套科学有效的遗传研究方法,来研究遗传因子的规律。孟德尔创立的这套方法一直沿用到 1950s,才被分子遗传学方法取代。思考题 二、基因是一段 DNA 序列 1、基因在染色体上 摩根实验室用果蝇为材料的工作,确定了基因在染色体上的分布规律。 随着生物化学的发展,蛋白质、核酸等生物大分子逐渐分离、纯化出来。各方面的实验证据表明,基因的化学本质不是蛋白质,而是 DNA。格里菲斯的实验证明遗传物质可以转化进入细菌,改变细菌特性。爱弗莱的实验证实,进入细菌改变特性的遗传物质是 DNA,而不是蛋白质。 3、华生和克里克提出 DNA 双螺旋模型。 DNA 双螺旋模型说明 DNA 分子能 够充当遗传的物质基础。 华生和克里克的著名论文 4、DNA作为遗传物质的功能 5、基因理论中的许多复杂情况 以孟德尔学说为开端的遗传理论,发展到以 DNA 分子结构为基础的分子遗传学,使我们对遗传规律有了确切的理解。 应该看到,实际上生命世界的遗传现象远比上面谈到的要复杂得多。 一个基因一个性状?不一定。例如肤色的控制至少有三个基因参与。 基因决定性状,环境还起不起作用?在基因型确定的基础上, 环境常常会影响表型。 三、基因工程技术和应用 将外源基因(又称目的基因,是一段 DNA 片断)组合到载体 DNA 分子中去,再把它转到受体细胞(亦称寄主细胞)中去,使外源基因在寄主细胞中增值和表达,从而得到期望的由这个外源基因所编码的蛋白质。 所以,基因工程的操作包含以下步骤: ? 获得目的基因 ? 构造重组 DNA 分子 ? 转化或转染 ? 表达 ? 蛋白质产物的分离纯化 到哪里去找目的基因?一般来说,人的基因,要从人体的组织细胞中去找;小鼠的基因要从小鼠的组织细胞中去找。 从组织细胞中可以分离得到人/小鼠的全套基因,称为基因文库。文库中基因总数 就人来说约有 3 万个基因。如何从中把需要的基因找出来?采取“钓”的办法。这个办法通常称为印迹法。 印迹法的关键是“分子杂交”,利用碱基配对的原则,用一段小的已知的 DNA 片断去寻找(“钓”)大的未知的基因片断。 探针 DNA 片断从何而来? 根据目的蛋白的氨基酸序列,只要其中 N-端 15-20 个氨基酸序列,按三联密码转为 40-60 核苷酸序列,人工合成,即为探针 DNA 片断。 (2)目的基因的扩增 (3)PCR —— 把寻找目的基因和扩增目的基因两步操作并成一步。 PCR 的三个步骤为一次循环,约需5-10 分钟。每经一次循环,所找到的目的基因扩充一倍。经过 20 次循环,即可扩增 106 倍,总共只需几个小时。 (4)构造重组 DNA 分子 其次要把目的基因“装”到载体中去。“安装”的过程,需要好几种工具酶,其中关键的酶叫 限制性内切酶。 此酶识别一定碱基序列,有的还可切出“粘性”末端,使得目的基因和载体的连接非常容易。 (5)转化/转染—表达—蛋白质分离 重组 DN
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