实验7标本中未知细菌的分离和鉴定重点.ppt

实验十 标本中未知细菌的分离和鉴定 （一）实验目的 1、掌握脓汁标本中常见病原菌分离和鉴定方法 2、掌握药物敏感试验 （二）实验器材 1、待检的脓汁标本； 2、培养基：血琼脂平板，生化反应管；普通琼脂平板； 3、试剂：革兰染色液，生理盐水；药敏纸片，3%过氧化氢； 4、其它：接种环、接种针、酒精灯、培养箱、显微镜、载玻片等 直接涂片染色镜检：观察细菌形态、排列、染色性 观察菌落性状、溶血性、色素 血琼脂平板 涂片、染色、镜检 挑取可疑菌落 生化反应测定 纯培养 致病性测定 （凝固酶、耐热核酸酶） 1.触酶试验：区别葡萄球菌与链球菌； 2.甘露醇分解试验：区别葡萄球菌的致病菌株与非致病菌，致病菌分解甘露醇产酸,使培养基由紫色变黄色. 二、标本中未知肠道感染细菌的分离和鉴定 （一）实验目的 1、掌握肠道杆菌分离和鉴定的一般步骤 2、熟悉肠道杆菌鉴定生化反应和血清学反应 （二）实验器材 1、待检的粪便标本； 2、培养基：SS平板，生化反应管；普通琼脂平板； 3、试剂：革兰染色液，生理盐水；药敏纸片；沙门菌、志贺菌多价诊断血清； 4、其它：接种环、接种针、酒精灯、培养箱、显微镜、载玻片等。 肠道杆菌五管糖试验 肠道杆菌的血清学试验（玻片凝集试验） 材料 1. 菌种：伤寒杆菌培养物、痢疾杆菌培养物 2. 伤寒杆菌的诊断血清，志贺菌诊断血清、载玻片、生理盐水 方法 肠道杆菌生化反应的结果 * * 致病菌的检验程序和常用项目 药物敏感试验 直接涂片 染色镜检 分离培养 形态特征 生化试验 血清学试验 动物实验 明确诊断 初步诊断 血清学诊断 细菌的快速鉴定 形态学检查 （常规培养或 特殊培养） （沉淀反应、凝集试验、免疫标记技术等） (微生物数字编码分类鉴定法、血培养自动化检测系统、核酸杂交技术、PCR技术、DNA芯片技术等） 一、标本中未知病原性球菌的分离和鉴定 标本 血液 脑脊液 肉汤增菌培养 涂片染色镜检 （三）实验方法与检验流程 脓拭子 分离培养 （血平板） 直接涂片 革兰染色 革兰染色 触酶试验 甘露醇试验 药敏试验 纯培养 （三）实验方法与检验流程 生化反应 革兰染色的操作步骤 涂片制作 染 色 镜 检 革兰染色的操作步骤 初染 媒染 脱色 复染 结晶紫1分钟 卢戈氏碘液1分钟 95%酒精30秒 稀释复红30秒 （+） （—） 甘露醇发酵试验 (-) (+) 脓汁标本的生化反应 药敏试验 粪便标本 SS平板 克氏双糖铁斜面培养基 生化反应管 观察结果 玻片凝集试验 （三）实验方法与检验流程 纯培养 革兰染色 ＋/－ － ＋/ － － ⊕ 变形杆菌 － ＋ ＋ － ＋ 沙门菌 － ＋ ＋/ － － ＋ 志贺菌 ＋/ － ＋ ＋ ⊕ ⊕ 大肠埃希菌 蔗糖 甘乳糖 麦芽糖 乳糖 葡萄糖 菌名 血清 生理盐水