实验八线粒体和液泡系的超活染色与观察重点.ppt

线粒体和液泡系的超活染色与观察 1 2 实验目的 观察植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、发育和分布 了解细胞和细胞器的超活染色技术 实验目的 实验原理 活体染色技术 线粒体及其超活染色 液泡系及其超活染色 实验原理 概念 原理 分类 利用某些无毒或毒性很小的染料来显示细胞内某些天然结构，而不影响细胞的生命活动或产生任何物理、化学变化以致引起细胞的死亡。 活体染料之所以能固定,堆积在细胞内某些特殊的部分,主要是靠染料的电化学特性. 体内活体染色 体外活体染色 （超活染色） 实验原理 线粒体是细胞内氧化磷酸化和 形成ATP的主要场所 1 2 线粒体一般呈粒状或杆状，但因生物种类和生理状态而异，可呈环形，哑铃形、线状、分杈状或其它形状。 在多数细胞中,线粒体均匀分布在整个细胞质中,但在某些细胞中,线粒体的分布是不均一的,有时线粒体聚集在细胞质的边缘。 实验原理 线粒体的超活染色 线粒体的超活染色 about Janus green B 线粒体的专一性活体染色剂 染色原理 线粒体 蓝绿色（氧化状态） 细胞质中 无色（还原状态） Janus green B Janus green B 细胞色素氧化酶 实验原理 洋葱鳞茎内表皮细胞 细胞壁 线粒体 细胞核 液泡 细胞质 实验原理 液泡系 在电子显微镜下可明确地看到在细胞内有很多囊状结构，它们互相吻合，在细胞内构成复杂的网状结构。如果从立体的角度来看，这些囊状结构形成一个内腔连接起来的膜系，并能与外部的细胞质基质区别开来。 实验原理 中性红 一种弱碱性pH指示剂，变色范围在pH6.4-8.0之间（红—橙） 染色原理 液泡系 红色 （多呈酸性） 发生解离 中性红 液泡系的超活染色 细胞壁 线粒体 细胞核 液泡 细胞质 实验原理 实验步骤 洋葱鳞茎内表皮细胞 线粒体的超活染色 在载玻片上加一滴Janus green B 取一小片洋葱鳞茎内表皮细胞 置于Janus green B中20min 吸去染液,加一滴 Ringer液,盖上盖玻片 显微镜下观察 注意事项 请将载玻片置于水池上的搁架上再滴加染液 洋葱鳞茎内表皮细胞应尽量撕取得薄一些 应使洋葱内表皮完全浸在染液中 盖上盖玻片后，将多余的Ringer液吸去 实验步骤 实验步骤 在载玻片上加一滴中性红 取一小片洋葱鳞茎内表皮细胞 置于中性红中15min 吸去染液,加一滴 Ringer液,盖上盖玻片 显微镜下观察 洋葱鳞茎内表皮细胞 液泡系的超活染色 绘出洋葱鳞茎内表皮细胞线粒体的形态与分布。 绘出洋葱鳞茎内表皮细胞液泡系的形态与分布。 实验结果及分析 实验结果及分析 实验步骤 在载玻片上加一滴 Janus green B 取一小片洋葱鳞茎 内表皮细胞 置于Janus green B 中20min 吸去染液,加一滴 Ringer液,盖上盖玻片 显微镜下观察 注意事项 请将载玻片置于水池上的搁架上再滴加染液 洋葱鳞茎内表皮细胞 应尽量撕取得薄一些 应使洋葱内表皮 完全浸在染液中 盖上盖玻片后，将 多余的Ringer液吸去 采用显微互动进行观 察，请先在显微镜上 调节好后，再打开电脑 在载玻片上加一滴 中性红 取一小片洋葱鳞茎 内表皮细胞 置于中性红 中15min 吸去染液,加一滴 Ringer液,盖上盖玻片 显微镜下观察 线粒体的超活染色 液泡系的超活染色