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生物必修三;动物细胞工程常用的技术手段:;植物细胞工程;细胞的全能性;3、实现条件:
离体、提供营养物质、激素及其他适宜条件。
4 、全能性的比较
受精卵 生殖细胞 体细胞
植物细胞﹥动物细胞;切取
形成层;(1)外植体:用于离体培养的植物器官或组织片段。
(2)愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。
(3)脱分化:由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程。
(4)再分化:脱分化产生的愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程。;影响植物组织培养的因素:PI33
(1)植物材料的选择:直接关系到实验的成败。
(2)营养因素:需要配制适宜的培养基,保证营养的供应,常用MS培养基。
(3)使用激素进行调节:生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。要注意激素的浓度、使用的先后顺序及用量的比例。
(4)环境条件的控制:注意控制pH、温度、光照等外界条件。;MS培养基:
(1)大量元素:C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg;
(2)微量元素:Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Co、I;
(3)有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素及蔗糖等。
微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐;
蔗糖提供碳源,同时能够维持细胞的渗透压;
甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。 ;植物激素调节:
(1)在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强的趋势;
(2)使用顺序影响实验结果:
(3)激素用量的比例影响实验结果:
生长素用量比细胞分裂素用量,比值高时,有利于根的分化、抑制芽的形成;比值低时,有利于芽的分化,抑制根的形成;比值适中时,促进愈伤组织的生长。;植物组织培养的实验操作;制备MS固体培养基:
(1)配制各种母液:大量元素浓缩10倍,微量元素浓缩100倍;激素类等按1mg/Ml质量浓度单独配制成母液。
(2)配制培养基:按比例配制各种所需成分,依需要决定是否加入植物激素;
(3)灭菌:将培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌。
外植体消毒:依下列顺序进行消毒:
流水冲洗→洗衣粉洗→流水冲洗→无菌吸水纸吸干→70%酒精→无菌水冲洗→无菌吸水纸吸干→0.1%氯化汞溶液→无菌水冲洗;1.植物细胞表现出全能性的条件有哪些?
2.在植物组培过程中,为什么要进行一系列的消毒,灭菌,并且要求无菌操作?
3、为什么切取胡萝卜根的形成层,其他部分也能培养成小植株吗?;
5、为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养?
;植物组织培养的培养基;杂种植株;1.两个来自不同植物的体细胞完成融合,遇到的第一个障碍是什么?
2.怎么样去解决这个障碍?
3.两个原生质体能发生融合,这与细胞膜的什么特性有关?;基本技术:
(1)去除细胞壁:
酶解法——纤维素酶和果胶酶
(2)人工诱导细胞原生质体融合:
物理法:离心、振动、电激等
化学法:聚乙二醇(PEG)
(3)杂种细胞培育:
植物组织培养
意义:
克服远源杂交不亲和的障碍、在培育作物新品种方面,可大大扩展可用于杂交的亲本组合范围。未解决的问题:未能让杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良。 ;(一) 植物繁殖的新途径; (1)材料:无病毒的茎尖。
(2)脱毒苗:切取茎尖进行组织培养获得。;3.神奇的人工种子
; 人工种子的概念中包含的“具有正常发育能力的材料”通常是指胚状体(目前国外有使用不定芽、顶芽和腋芽的),它可以由三种途径产生:
A、由已脱分化的外植体直接产生;
B、由愈伤组织产生;
C、由悬浮细胞培养产生。;对胚状体的基本要求:
①播种后能快速出苗;
②根和芽几乎同时生长,不产生愈伤组织; ③同步化程度高;
④活力强;
⑤形成的幼苗的形态与生长要正常。
“外面包被着特定的物质”是指人工种皮,对人工种皮的要求是:能保持胚状体的活力,有利于贮藏运输和萌发。选取的材料要有韧性,耐压,对胚状体无毒害,含有胚状体发芽所需要的营养成分或植物激素,还应含有杀菌剂,以防播种后微生物的侵害。;植物人工种子制备技术的主要流程图:
外植体 → 诱导植物愈伤组织 → 体细胞胚的诱导 → 体细胞胚的成熟 → 体细胞胚的机械化包裹 → 贮藏或种植 ;(二) 作物新品种的培育;单倍体育种的实验流程。;(三) 细胞产物的工厂化生产;第一步,选择人参根作为外植体进行培养,产生愈伤组织,经过培养选择找到增殖速度快而且细胞内人参皂甙含量高的细胞株作为种质,其中一部分作为保存用,以备下一
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