实验六大肠杆菌和沙门氏杆菌重点.ppt

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E.Coli为兼性厌氧菌,在普通培养基上生长良好,最适宜生长温度为37℃,最适合生长pH为7.2~7.4。麦康凯琼脂上形成红色菌落,在伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属闪光的菌落,在SS琼脂上一般不生长或者生长较差,生长的菌落呈红色。 一些致病性菌株在绵羊血液平板上呈β型溶血。在营养琼脂上生长24h,形成圆形、隆起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落,直径2~3mm。 大肠杆菌(E.coli) 动物致病性大肠杆菌分离鉴定程序 沙门氏杆菌微生生学诊断程序 多杀性巴氏杆菌(Pasteurelloa maltocida) 微生物学诊断 病料:(渗出液、心血、肝、脾、淋巴结、骨髓等) 涂片镜检:G-;瑞氏/美兰(新鲜病料)两极着染;球杆菌 培养 分离培养:血液/血清裂解血平板 菌落形状 增 菌 :血清肉汤 运动性 不溶血 G-菌球杆 动物接种:小白鼠皮下接种 死亡检剖败血症 可疑菌落 脏器涂片镜检 分离培养 纯培养 * * 实验六 大肠杆菌和沙门氏杆菌 目的要求: 1、掌握致病大肠杆菌、沙门氏杆菌的微生物学诊断方法。 2、熟悉致病大肠杆菌、沙门氏杆菌形态、培养特性。 实验内容: 一、观察致病大肠杆菌、沙门氏杆菌形态、培养特性。 二、接种大肠杆菌、沙门氏杆菌于鉴别培养基(远腾、SS、BTB),观察结果。 三、大肠杆菌、沙门氏杆菌的微生物学诊断程序。 大肠杆菌 大肠杆菌 大肠杆菌 麦康凯培养基上形成红色菌落; 伊红美蓝平板:黑色带有金属光泽菌落; 远腾琼脂平板:红色带有光泽菌落 大肠杆菌 大肠杆菌 结果观察 大肠杆菌 葡 乳 麦 甘 蔗 ⊕ ⊕ ⊕ ⊕ ⊕ 沙门氏菌 葡 乳 麦 甘 蔗 + - + + - 挑取疑似菌落5-10个分别接种TSI和普通琼脂斜面 TSI呈A(K)/A 反应的,其STI +(-) 生长物或普通琼脂斜面纯培养菌 粪便、肠内容物及肠黏膜刮取物 血液、肠淋巴结及其他病变组织 麦康凯或伊红美 兰平板划线分离 病料 麦康凯或血琼脂平板划线分离 革兰氏染色镜检 ETEC菌株毒力因子鉴定 血清型鉴定 生化试验鉴定 猪水肿病菌株 挑取疑似菌落分别接种TSI和尿素培养基 TSI呈 K(A)/K 反应的,尿素分解阴性的STI培养菌 +(-), +(-) 未污染病料 污染病料 在肠道杆菌鉴别培养基上划线分离 病料 用肠道杆菌增菌培养基增菌 革兰氏染色镜检 报告鉴定结果 血清型鉴定 沙门菌生化鉴定 沙门菌A-F群多价O血清平板凝集 普通斜面纯培养 菌株鉴定 多杀性巴氏菌 革兰氏染色的肺组织中有大量阴性球杆菌 *

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