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实验常用试剂、缓冲液的配制方法
1、1M Tris-HCl??????????? □组份浓度 1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0)???□配制量 1L ????□配置方法 1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。 ?????????????????????????2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。?????????????????????????3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。 ??????????????????????????????????????????????????????? pH值????????????????????? 浓HCl?????????????????????????????????????????????????????????7.4??????????????????????? ?约70mL ??????????????????????????????????????????????????????? 7.6??????????????????????? ?约60mL ??????????????????????????????????????????????????????? 8.0???????????????????????? 约42mL ??????????????????????? 4. 将溶解定容至1L。????????????????????????5. 高温高压灭菌后,室温保存。???????????????????????????注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大,温度每升高1,溶液的pH值大约降低0.03个单位。?2、1.5 M Tris-HCl????□组份浓度 1.5 M Tris-HCl ??? (pH8.8)??????????? □配制量 1L ????????□配置方法 1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。 ?????????????????????????? 2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。 ?????????????????????????? 3. 用浓盐酸调pH值至8.8。 ????????????????????????????4. 将溶液定容至1L。 ???????????????????????? 5. 高温高压灭菌后,室温保存。??????? 注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1,溶液的pH值大约降低0.03个单位。?3、10×TE Buffer??????? □组份浓度 100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0) ?□配制量 1L ?□配置方法 1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。 ??????????????????????????????1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0) 100mL ???????????????????????????? 500 mM EDTA(pH8.0) 20mL ??????????????????????2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。 ???????????????????? 3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。 ???????????????????? 4. 室温保存。 4、3 M 醋酸钠?????□组份浓度 3 M 醋酸钠 ??? (pH5.2)??????????□配制量 100mL ??? □配置方法 1. 称取40.8gNaOAc?3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。 ??????????????????????????2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。 ?????????????????????? 3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。 ?????????????????????????4. 高温高压灭菌后,室温保存。 5、PBS Buffer????????? □组份浓度 137 mM NaCl,2.7mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4 ??????????????????????????????? □配制量 1L □配置方法 1. 称量下列试剂,置于1L烧杯中。 ????????????????????????????????????????????????????? NaCl???????? ?????????
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