2常用实验动物的基本操作.doc

常用实验动物的基本操作 在进行动物实验前，应准备饲养室和各种饲养设施以及用具，并在启用前进行彻底消毒。购买实验动物应了解实验动物的遗传背景资料、动物微生物学检查资料以及动物的年龄和健康等方面的情况，并根据外观检查动物的健康状况，主要包括以下内容：（1）皮毛的光泽度；（2）眼部有无流泪、角膜损伤以及白内障等现象；（3）耳朵有无外伤或炎症；（4）四肢有无外伤、炎症以及弯曲等现象；（5）肛门状况是否正常等。 实验动物购买后进行一周的饲养和观察，确保正常后方可实验。实验过程中动物的编号、抓取固定和注射免疫必须遵循相应的方法。下面对这些方法和技术逐一叙述。 一 实验动物的固定 正确掌握动物固定方法，可以防止动物过度挣扎或受损伤而影响实验观察效果，并可避免实验者被咬伤，从而保证实验顺利进行。抓取动物前，必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴，不能恐吓动物，同时要爱惜动物，使动物少受痛苦。小鼠右手提起鼠尾，将小鼠轻轻向后拉，这可使小鼠前肢抓住粗糙面不动，用左手拇指和食指捏住鼠头皮肤，其余三指和掌心夹住其背部皮肤及尾部，小鼠完全固定在左手中（图），右手可注射其它操作。 图 小鼠的方法 图2 大鼠的方法2 、大 鼠 大鼠牙尖性猛，捉拿时为大鼠在惊恐或激怒咬伤，应带上手套固定的方法与小鼠基本相同。用右手将鼠尾提起，放在粗糙上，向后轻拉鼠尾，使其不动，用左手拇指和食指捏住鼠头皮肤其余三指和手掌固定鼠体，使其头、颈、腹呈一直线（图2），这时右手注射需进行手术，应对大鼠进行麻醉固定于手术台上需尾静脉取血或注射，将大鼠固定，使其尾巴。 3 豚 鼠 豚鼠性情温和，不咬人，胆小易惊抓取幼小豚鼠时，用双手捧起来对体型较大或怀孕的豚鼠，先用手掌住鼠背，肩胛上方，拇指和食指环握颈部，另一只手托住其臀部（图3）。 图3 豚鼠的 4、 家 兔 一般不咬人，但脚尖，避免抓伤。抓取时将兔轻轻提起，另一手托其臀部，使其躯干的重量大部分集中在该手上，然后实验需要将兔固定成姿势（图4）。因为兔耳不能承受全身重量，易造成疼痛而引起挣扎，抓兔时不单提两耳。 图4 家兔的与固定5 、青蛙和蟾蜍 用左手握住动物，以食指和中指夹住一侧前肢，大拇指压住另一前肢，用右手协助，将两后肢拉直，左手无名指和小指将其压住固定（图5）。抓取蟾蜍时，可先在蟾蜍体部包一层湿布，用左手将其背部贴紧手掌固定，把后肢拉直，并用左手的中指、无名指及小指夹住，前肢用拇指及食指压住，右手即可进行实验操作。抓取蟾蜍时不要挤压两侧耳部突起的毒腺，以免毒液射到眼睛里需要长时间固定时，可将蟾蜍麻醉或脑脊髓后，用大头针钉在蛙板上。 图5 蟾蜍的与固定 二 实验动物的编号 将动物做上不同的标记加以区别。常用的编号标记方法有染色法、挂牌法和烙印法。家兔等较大动物可用特制的号码牌固定于耳上，而小动物则常用染色法。染色法是药学实验课中最常使用的方法，通常用化学试剂涂动物背部，常用染色的化学试剂： 黄色：3%-5%苦味酸溶液咖啡色：20%硝酸银溶液 红色：0.5%中性红或品红溶液黑色：煤焦油的酒精溶液（1）1-10号标记法：编号的原则是先左后右，从前到后，如（图6） （2）10-100号标记法：在上述编号的同一部位，各种化学试剂擦上斑点，就可代表相应的十位数，例如涂上的代表，色代表，此类推。图6 大鼠、小鼠标记法三 实验动物的给药方法通常选择背部皮下注射皮下，针尖左右摆动，易摆动说明针尖确已刺入皮下，然后注射药液拔针时，防止药液外漏（图）注射药量为0.1-0.3mL/10g。在大腿内侧注射 图 小鼠皮下注射法 小鼠因肌肉较少，很少采用肌肉注射，若有需要可注射于股部肌肉，多选后腿上部外侧，一处注射量不超过0.1mL。 腹部向上注射部位腹部的左、右下外侧1/4的部位此处无重要器官一次注射量为0.1-0.2mL/10g体重（图）。 图 小鼠腹腔注射法 图 小鼠尾静脉注射法），使尾巴露出，尾巴于45-50°C的温水中浸泡min或用75%的酒精棉球擦拭，使血管充血，一次注射量为0.05-0.1mL/10g体重（图）。注射部位可选择前肢皮下静脉、后肢小隐静脉、耳壳静脉或雄鼠的阴茎静脉，偶尔亦可用心脏穿刺给药。也可在胫前部将皮肤切开一小口，暴露出胫前静脉后注射，一次注射量不