厦大微生物第七章微生物遗传变异与育种.ppt

●原核与真核微生物基因组大小 细菌染色体数目与形状 ●细菌染色体结构 真核微生物染色体结构 (示核小体） 基本基 完全基 补充基 野生型 + + + 营缺型 — + + 原养型 + + + （3）筛选步骤 1）诱变 2）淘汰野生型：抗生素法、菌丝过滤法 3）检出： 夹层培养法；限量补充法 逐个检出法；影印平板法 ●夹层培养法 （4）鉴定缺陷型(生长谱法) 1）制备基本 培养基； 2）加充分洗 涤菌悬液； 3）加待测营 养物； 4）观察生长。 ● 定位（点）诱变 盒式诱变 寡核苷酸引物诱变 Strain improvement for fermentation and biocatalysis processes by genetic engineering technology 建议读物 §.3 基因重组 ●基因重组（遗传重组）： 两个独立基因组内的遗传物 质，通过一定的途径转移到一 起，形成新的稳定的基因组过程。 ●遗传工程 ----基因重组技术 经典、同源、生物自然属性、 体内 ----DNA重组技术： 分子水平、同-- 异源、体外 一、原核生物的基因重组 （一）转化 受体菌直接吸收供体菌游离的 DNA片段而获得部分遗传性状的现 象。 1、转化的基本条件 （1）感受态： 受体菌最容易接受外源DNA 片段并能实现转化的一种生理状态。 影响因素： ---遗传因素（感受态因子;种属的特异性；） ---外部因素（CAMP、聚乙二醇、二价阳 离子---低温低渗CaCl处理、培养条件） ●利用选择标记鉴别携带外源片段的转化子 (双抗菌素对照筛选） 建议读物 §.2 基因突变和诱变育种 一、基因突变 ●野生型菌株：从自然界分离获得的菌株， 称之为~。 ●基本培养基(MM)：满足野生型菌株生长最 低营养要求的合成培养基。 （一）突变类型 ●营养缺陷型：野生型菌株由于突变而丧失 了 某种营养合成能力，而无法在基本培 养基上生长的变异类型。 表示： 基 因：his+，his - ； 表 型：His + ，His - ●抗性突变型： 野生型菌株由于突变而产了对某些化学药物或致死物理因子抗性变异类型。 表示： 基 因： strr、strs； tetr、tets； 表 型：Str r ， Str s ●条件致死突变型： 某些菌株或病毒经基因突变后，在某种条件可生长并实现表型，而在另一条件却无法生长繁殖的突变类型。 (如温度敏感突变株：Ts） ●形态突变株 ●抗原突变株 ●产量突变株 ●突变株类型划分： ----选择性突变株：营养缺陷型、抗性 突变型、条件致死突变型 ----非选择突变株：形态、抗原、产量 突变型 （二）突变率及其捡出 ●突变率： 某一细胞在每一世代中发生突变的几率。常用单位群体中每一世代产生的突变株的数目来表示。 ●突变株的捡出及突变率的计算 捡出方法： 1）选择性突变株 ----营养缺陷型 ----抗药性突变 回复突变: （三）基因突变的自发性与不对称性 ●突变的自发性：基因可自发产生突变。 （辐射、自身有害物质、碱基配对错误） ●突变的不对应性：突变性状与引起突变 的环境因素无直接对应关系。 ●平板影印培养试验 (Lederberg) （四）基因突变及其机制 1、诱发突变 (点突变, 畸变) 1)点突变 (1)碱基置换 ---转换 ---颠换 ●可能的突变型： 错义突变