槐花米中芸香的提取及槲皮素的制备和检识.pptVIP

实验二槐花米中芸香苷的提取及槲皮素的制备与检识 目的要求 学习和掌握芸香苷的提取及检测技术 学会利用芸香苷的水解作用制备糖类及苷元 实验原理 芸香苷俗称芦丁。广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为植物槐树的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。 芦丁是由槲皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖脱水缩合形成的苷。[芸香糖（Rutinose）为葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖。 实验原理 实验原理 芦丁具有维生素P样作用。有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，主要用作防治高血压病的辅助治疗（但不能降压）剂，亦可防治因缺芦丁所致的其它出血症。多作口服，也可作注射用。 实验原理 提取芦丁的方法很多，目前我国多采用碱提取- 酸沉淀法。该法的提取原理是依据芦丁结构中含有酚羟基，能与碱反应生成盐而溶于水中，向此盐溶液中加入酸，则芦丁游离析出。此外，还可以采用水或醇提取法。 芸香苷的提取 芸香苷的提取 （粗提） 方法Ⅱ ：碱溶酸沉法 芸香苷的提取（精制） 芸香苷的水解 芸香苷、槲皮素及糖的检识 实验名称 实验试剂 现象 芸香苷 槲皮素 Molish反应 10%α-萘酚乙醇 紫色环 无现象 溶液-浓硫酸 盐酸-镁粉反应 盐酸-镁粉 红色～紫红色 醋酸镁反应 1％醋酸镁甲醇 黄色荧光（紫外灯） 溶液（滤纸） 三氯化铝反应 1％三氯化铝乙 黄色荧光 醇溶液（紫外灯） 锆-柠檬酸反应 2％二氯氧锆甲醇溶液 黄色并 黄色 2％柠檬酸甲醇溶液3～4滴 褪色 不褪色 芸香苷、槲皮素及糖的检识 1、酸性试验： 取小试管8支，每4支一组，第一组每管中加入芸香苷1mg，第二组每管中加入槲皮素1mg，每组四管中分别加入稀氨水、5%碳酸氢钠水溶液、5%碳酸钠水溶液、1%氢氧化钠水溶液各2 ml，振摇后观察各管溶解情况。溶解的溶液应呈黄色。再加浓盐酸数滴酸化，黄色褪去或变浅，并有沉淀析出或产生混浊。 芸香苷、槲皮素及糖的检识 2、Molish反应： 取试样1 mg置小试管中，加乙醇0.5 ml溶解，加α-萘酚试剂1~2滴，摇匀。倾斜试管，沿管壁徐徐注入浓硫酸约0.5 ml静置。观察两层溶液的界面变化，出现紫色环者为阳性，表示样品分子中含有糖的结构（糖和苷类均呈阳性反应），比较芸香苷和槲皮素的不同。 芸香苷、槲皮素及糖的检识 3、盐酸-镁粉反应： 取芸香苷1 mg，加乙醇2 ml，在水浴上加热溶解，加镁粉约50 mg，滴加数滴浓盐酸，溶液由黄色渐变红色者表示有黄酮类化合物。以同法试验槲皮素。 如用锌粉代替镁粉，则芸香苷（3-羟基与糖结合成苷）仍有作用，而槲皮素（黄酮醇类）不呈还原显色反应。因此可区别两者。 芸香苷、槲皮素及糖的检识 4、三氯化铝反应： 取样品1 mg溶于甲醇中，加1%三氯化铝甲醇溶液2~3滴，黄酮类呈鲜黄色，并有荧光。 5、锆-柠檬酸反应： 取样品1 mg，加甲醇2 ml，在水浴上加热溶解，再加2%二氯氧锆甲醇溶液3~4滴，凡有3-羟基或5-羟基的黄酮即呈鲜黄色。然后加2%柠檬酸甲醇溶液3~4滴，有3-羟基的黄酮黄色不褪。比较芸香苷和槲皮素的不同。 芸香苷、槲皮素及糖的检识 6、Fehling试验： 取试样数mg，溶于0.5 ml热水中，加斐林氏试剂甲、乙等量混合液2 ml，沸水浴上加热，如产生氧化亚铜的暗红色或黄色沉淀表示有还原糖或其它还原性物质。充分加热作用后滤去沉淀，滤液滴加浓盐酸酸化，在水浴上加热水解，水解液以10% NaOH 中和，再进行斐