qbx_微生物的实验室培养修改版概述.ppt

微生物基础知识 下列哪些事物适用于消毒处理(　　) ①皮肤　②饮用水　③牛奶　④注射器　⑤培养皿　⑥接种环　⑦培养基　⑧果汁　⑨酱油　⑩手术刀 A．①②③⑧⑨　　　　　 B．④⑤⑥⑦⑩ C．①②③④⑤⑥⑧ D．以上全部 * 专题2 微生物的培养与应用 特点：小; 简单; 低等; 代谢速度快。 微生物 病毒 细菌 放线菌 真菌 原生生物 是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称． 原核生物 非细胞结构 真核生物 课题1 微生物的实验室培养 1.何为培养基？ 阅读教材P14~16相关内容，回答以下问题： 2.按照不同的划分标准，培养基有哪些种类、配制特点及其应用？ （一）培养基 3.常用的消毒和灭菌方法有哪些？ 一.培养基： 人工提供微生物生存的环境和营养物质 1.基本成分： 思考：微生物“吃”什么？ 碳源、氮源、水、无机盐 ⑴碳源 无机： 有机： CO2、CO32-、HCO3- 牛肉膏、蛋白胨等 自养型 异养型 ⑵氮源 无机： 有机： NH4＋、NO3- 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 物理性质 用途 特点 培养基种类 划分标准 培养基的种类 不加 凝固剂 加凝固剂 （琼脂、明胶） 工业生产 观察微生物的运动、分类鉴定 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 液体 半固体 固体 耐高温需保持干燥的 物品，160～170℃ 1～2小时 接种环、接种针等 金属用具 70~75℃、30min 80℃、15min 100℃、5~6min 消毒 灭菌 定 义 方 法 较为温和理化方法， 杀死部分有害菌体 （不包括芽孢、孢子） 强烈的理化方法， 杀死所有微生物 （包括芽孢、孢子） 煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药剂 紫外线 灼烧灭菌 干热灭菌 酒精、氯气、石炭酸等 高压蒸汽灭菌 培养基， 100KPa、 121℃、15～30min 二.无菌技术： 防止外来杂菌的污染 1.消毒与灭菌： 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手 答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。 A 3.微生物实验室培养的基本操作程序 1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存 阅读P16-20 三、实验操作 （ 一）制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌） 1. 计算 2．称量 3．溶化 4．培养基灭菌 5．倒平板 留意：称量纸 加琼脂 方法？ 倒平板技术 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸锥形瓶，感觉刚刚不烫手 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 答：杂菌滋生，最好不要用 接种方法： 平板划线法: （二）、纯化大肠杆菌 （微生物的接种技术） 平板划线法和稀释涂布平板法 在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落. 菌落是鉴定菌种的重要依据。 一个菌落就是一个种群 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖形成一个肉眼可见、具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 接种方法： 平板划线法: （二）、纯化大肠杆菌 （微生物的接种技术） 平板划线法和稀释涂布平板法 在数次画线后,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落. 如何操作？ 平板划线的操作 一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二划破处的单个细胞无法形成规则的菌落。 划线结束后灼烧接种环：及时杀死残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 操作的第一步灼烧接种环：避免接种环上可能存在的微生物污染培养物； 讨论p18 讨论1. 每次划线前灼烧接种环：杀死上次划线结束后残留在接种环上的菌种，使下一次划线时，菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。 讨论2. 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 讨论3. 答：划线后，线条末端