2011年高三一轮复习系列——49微生物的培养与应用概述.ppt

典例分析 1.（2009·上海卷，39）氯苯化合物是重要的有机 化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究 小组依照下列实验方案（图1）筛选出能高效降 解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表1。 图1 表1 培养基的组成 液体培养基 蛋白胨 牛肉膏 氯苯 氯化钠 硝酸铵 无机盐（无碳） 蒸馏水 Ⅰ号 10 g 5 g 5 mg 5 g — — 1 L Ⅱ号 — — 50 mg 5 g 3 g 适量 1 L Ⅲ号 — — 20~80 mg 5 g 3 g 适量 1 L （1）配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培 养基成分外，还应添加1%的 。 （2）培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是 。 （3）从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分 别属于 培养基和 培养基。在Ⅱ号 培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是 。 （4）在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体会变 成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为 。 （5）将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养 液中培养，得到生长曲线（如图2）。从图2可知， SP1菌在 培养条件下最早停止生长，其原因 是 。 解析 配制固体培养基时应在液体培养基的成分中 再加入琼脂作为凝固剂。在配制培养基时应先调节 pH，后进行灭菌，防止灭菌后在调节pH的过程中 污染培养基。据表可知，培养基Ⅰ为牛肉膏蛋白胨 培养基，包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因 图2 子，适用于多种微生物的培养。培养基Ⅱ不加牛肉 膏和蛋白胨，以硝酸铵为氮源，可以选择出以硝酸 铵为氮源的微生物，是选择培养基。在营养缺乏、 环境恶劣时，微生物可以形成休眠体——芽孢，来 度过不良环境。据图2可知，SP1菌在20 mg/L氯苯 培养条件下菌体数最早达到最大值，即最早停止生 长，原因是在培养基Ⅲ中，氯苯是唯一碳源，由于 20 mg/L氯苯培养条件碳源最少，因此也最早被耗 尽，使SP1菌停止生长。 答案 （1）琼脂 （2）先调pH，后灭菌 （3）通用 选择 硝酸铵 （4）芽孢 （5）20 mg/L氯苯 碳 源最早耗尽 重点提示 2.通过“探究土壤微生物对尿素是否有分解作用” 的考查，提升“对一些生物学问题进行初步探究” 的能力。 典例分析 2.同学们为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分 解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效 降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表 所示，实验步骤如下图所示。请分析回答问题： 10 g 尿素 0.2 g MgSO4·7H2O 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL 15 g 琼脂 1 g 葡萄糖 2.1 g Na2HPO4 1.4 g KH2PO4 （1）简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及 原理: 。 （2）培养基中加入尿素的目的是筛选 ， 这种培养基属于 培养基。 （3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自 培养基中的 和 ，实验中需要振荡 培养，原因是 。 （4）转为固体培养基时，常采用 接种， 获得单菌落后继续筛选。 （5）实验结束后，使用过的培养基应该进行 处理后，才能倒掉。 解析 尿素是培养基中的唯一氮源，因此原则上只 有能够利用尿素的微生物才能够在此培养基上生长。 由于细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，pH升高，故 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入的酚红指示剂 将变成红色；这种培养基属于选择培养基，可筛选 目的菌；其生长所需的氮源和碳源分别来自培养基 中的尿素和葡萄糖；振荡培养的目的是提供氧气； 固体培养基培养时的接种方法常用稀释涂布平板法 或平板划线法；最后，别忘记如果倒掉培养基，之 前应灭菌处理。 答案 （1）在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚 红指示剂，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，pH升 高，使酚红指示剂变为红色 （2）目的菌 选择 （3）尿素