20病毒感染的检查方法与防治原则概述.ppt

* * * 二、人工被动免疫常用生物制品 免疫球蛋白 血清丙种球蛋白 细胞免疫制剂 IFN-α、β、γ 细胞因子 IL-2、IL-6、IL-12 TNF 、CSF 淋巴因子激活的杀伤细胞 ——LAK细胞 三、病毒感染的治疗 核苷类药物 非核苷类反转录酶抑制剂 蛋白酶抑制剂 2.干扰素和干扰素诱生剂 3.中草药 4.基因治疗剂 5.治疗性疫苗 1.抗病毒化学制剂 反义寡核苷酸 干扰RNA 核酶（ribozyme） 核苷类药物作用机制 HSV/VZV 无环鸟苷（NA） 病毒胸苷激酶 NA一磷酸 宿主细胞激酶 NA三磷酸 （缺乏糖环3’-OH基） 病毒DNA聚合酶 核酸链延伸被迫终止 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 病毒感染的检查方法与防治原则 第20章 目的与要求 了解病毒的诊断，抗病毒治疗，病毒感染的预防。 第一节 病毒感染的检查方法 病毒感染的检查 检测内容 查病毒 查特异性抗体 病毒颗粒 病毒抗原 病毒核酸 病毒酶类：如逆转录酶 电镜直接观察 光镜检查包涵体 分离培养 一、标本的采集与送检 原则基本与细菌相似，但应注意： 1.标本用“双抗”或两性霉素B处理 2.低温保存，尽快送检 3.血清学诊断采双份血清 二、病毒的分离与鉴定 （一）病毒的分离培养 细胞培养（cell culture） 鸡胚接种（egg inoculation） 动物接种（animal inoculation） 1.鸡胚培养 采用孵化9～14天的鸡胚 绒毛尿囊膜 痘苗病毒、人类疱疹病毒 尿囊腔 接种部位 流感病毒、腮腺炎病毒 羊膜腔 流感病毒的初次分离 卵黄囊 嗜神经病毒 1、鸡胚培养 优点：易管理，不带微生物，成本较低 缺点：操作程序复杂 2.动物接种 应用：尚无敏感细胞的病毒培养 动物：兔、鼠、黑猩猩、猴等 优点：结果易观察，可建立动物模型 缺点：有饲养条件要求，费用高，动物 体内常带有潜伏病毒 病毒的分离培养 3.细胞培养 单层细胞培养（monolayer cell culture） 分类 悬浮细胞培养（suspended cell culture） 原代细胞（primary cell） 细胞种类 二倍体细胞（diploid cell） 传代细胞系（continuous cell line） 病毒的细胞培养 细胞培养瓶 单层细胞 1．病毒增殖鉴定 (1)细胞病变效应（cytopathic effect, CPE ） ①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等（多数病毒）； ②形成多核巨细胞或称融合细胞（麻疹病毒、巨细胞病毒、呼吸道合胞病毒等）； ③在培养细胞中形成包涵体（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。 （二）病毒的鉴定 ①细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落 麻疹病毒感染细胞 呼吸道合胞病毒感染细胞 ②形成多核巨细胞或称融合细胞 (1)细胞病变效应(cytopathic effect, CPE) ③形成包涵体(inclusion body) (1)细胞病变效应(cytopathic effect, CPE) 腮腺炎病毒感染细胞 (2)红细胞吸附（hemadsorption） 病毒囊膜表面血凝素(HA) ＋ 红细胞表面HA受体 (3)干扰现象（interference） 风疹病毒＋人胚肾细胞 病毒增殖，CPE(－) 埃可病毒＋人胚肾细胞 病毒增殖，CPE(＋) ＋人胚肾细