23免疫学检测24免疫学预防概述.ppt

第十章 免疫检测 第十章 免疫检测 第十章 免疫检测 主要内容 第一节 免疫细胞及其亚群的检测（自学） 第二节 免疫分子的检测（重点） 一、抗原、抗体的检测 （一）抗原 - 抗体反应的特点（自学） （二）抗原 - 抗体反应的影响因素（自学） （三）抗原 - 抗体反应的类型和检测方法（重点） 1.沉淀反应（自学） 2.凝集反应（自学） 3.补体参与的抗原抗体反应（自学） 4.免疫标记技术（重点） 5.蛋白芯片技术（自学） 二、细胞因子的检测（自学） 第三节 免疫学检测的临床应用 第二节 免疫分子的检测 （三）抗原抗体反应的类型和检测方法 ?4.免疫标记技术 （1）免疫荧光技术 （3）放射免疫测定法 （2）酶免疫测定法 ………. Ag-Ab + 标记技术。用以检测Ag或Ab的一种试验方法。 标记：荧光素、酶、放射性同位素等。标记后的Ag或Ab仍 有原有的生物学活性。 特点：敏感性高、特异性强、应用范围广，可定性、定量、定位。 4、免疫标记技术 免疫荧光技术 免疫酶测定法 放射免疫测定法 发光免疫分析 免疫胶体金技术 免疫印迹技术 Ag 荧光素 Ag 放射性同位素 酶 荧光显微镜 酶标检测仪 射线测量仪 化学发光物、金属颗粒等 用荧光素、放射性同位素、酶、金属颗粒及化学（或生物）发光剂等作为追踪物，标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应 ?免疫标记技术 Ag 硝酸纤维素膜和醋酸纤维素膜 利用吸附载体作为固相进行抗原抗体反应 吸附载体 聚苯乙烯微量反应板（酶标板） Ag 聚苯乙烯微量反应板（酶标板） 封阻/封闭（block） 包被（coat） Ag Ag 荧光素： 异硫氰酸荧光素（FITC）---------黄绿色荧光 四乙基罗丹明（RB200）-----------橙色荧光 四甲基异硫氰酸罗丹明（TMRITC）--橙红色 待检标本（固定在玻片上）+已知荧光抗体→洗去游离的荧光Ab →干燥后，荧光显微镜下观察。 用途：病毒感染的细胞、携带某种特异性Ag的细胞的检测。 a、直接荧光法 问题思考： 直接法会给我们的检测工作带来什么不方面？ 检测多种Ag需制备多种相应的荧光抗体标记。 用来检测标本中未知的Ag。 检测Ag。未标记Ab+待检Ag（未知）→（冲洗）+荧光标 记抗Ab→冲洗、干燥、荧光显微镜下观察。 b、间接荧光法 优点：敏感性高，制备一种荧光标记抗Ab即可对多种Ab-Ab系统进行检测。 缺点：易出现非特异性荧光。 直接酶标法 间接酶标法 辣根过氧化物酶（HRP） 碱性磷酸酶 抗抗体、二抗 酶联免疫吸附试验（ELISA） 双抗体夹心法——用已知抗体检测未知抗原 间接法——用已知抗原检测未知抗体 “免疫标记技术”小结 荧光标记法 酶联免疫吸附试验 直 接荧光法 间 接荧光法 夹心法 间接法 已知抗体包被于固相载体，加待测抗原，再加酶标抗体，显色；反之亦然（先加已知抗原） 标记抗原或者一抗 抗原包被于固相载体，加酶标一抗，再加酶标二抗，显色 标记二抗 课堂测试 1、下列哪项不是免疫标记技术的特点_______ A、提高了反应的灵敏度 B、反应的特异性更强 C、能进行定量检测 D、能进行定性检测 E、具有快速的优点 2、下列免疫学测定方法灵敏度最高的是______ A、沉淀反应 B、凝集反应 C、ELISA D、放射免疫测定 E、补体结合试验 3、免疫荧光抗体技术间接法是将荧光素标记在______ A、被检抗原上 B、已知抗体上 C、抗Ig抗体上 D、Ag—Ab复合物上 E、已知抗原上 4、ELISA的双抗体夹心法，固相载体的标记物是_______ A、待检抗原 B、已知抗原 C、已知抗体 D、酶标抗体 E、酶标抗原 5、检测可溶性抗原可以用______ A、直接凝集反应 B、酶联免疫吸附实验 C、放射性免疫分析法 D、直接荧光标记 6、间接标记技术一般主要用于检测______ A、未知抗原 B、未知抗体 C、两者都可以 第二十四章 免疫学防治 第一节 免疫预防（重点） 一、疫苗（重点） 二、疫苗的基本要求（自学） 三、计划免疫和预防接种注意事项（了解） 第二节 免疫治疗（自学） 老问题思考 第一次患严重疾病而病愈，第二次遭受同一严重疾病，患病结果会怎样？怎么解释？ 第十章 免疫检测 第十章 免疫检测 第十章 免疫检测