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【解析】 (1)因茎尖(或根尖)病毒极少,甚至无病毒,所以常用其作为外植体培育无病毒植株。(2)在植物组织培养的培养基中,除了添加植物必需的矿质元素外,还要添加有机物,添加植物激素有利于启动细胞分裂实现脱分化形成愈伤组织并且可诱导愈伤组织细胞再分化过程。若对外植体消毒不彻底,会造成外植体边缘局部污染。(3)在培养基中生长素与细胞分裂素的用量比值不同,诱导生根发芽结果不同,当比值低时,有利于发芽,比值高时,有利于生根。 【答案】 (1)茎尖(或根尖) 茎尖(或根尖)病毒极少,甚至无病毒 (2)有机物 植物激素 外植体消毒不彻底 (3)培养基中生长素类物质用量与细胞分裂素类物质用量的比值偏低 第 3 讲 植物的组织培养技术及 DNA和蛋白质技术 1.菊花组织培养与月季花培养的比较 考点一: 植物组织培养技术 高频考点突破 菊花组织培养 月季花药培养 相 同 点 原理 细胞的全能性 环节 培养基配制方法、无菌技术及接种操作基本相同 条件 受激素、pH、温度、光照等条件影响 不 同 点 选材 未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 合适的花粉 发育时期 培养基 MS培养基 配方要求更严格 流程 制备培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培 选材→消毒→接种→培养→鉴定和筛选→移栽 2.植物激素在组织培养过程中的重要作用 生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素,其作用及特点为: 激素使用 实验结果 使用 顺序 先生长素后 细胞分裂素 有利于细胞分裂 先细胞分裂素后 生长素 细胞既分裂也分化 生长素与细胞 分裂素同时使用 分化频率提高 生长素用 量与细胞 分裂素用 量的比例 该比值高时 利于根的分化, 抑制芽的形成 该比值低时 利于芽的分化, 抑制根的形成 该比值适中时 促进愈伤组织的生长 3.MS培养基的成分及各成分作用 成分 作用 微量和大量元素 提供植物细胞生活所必需的无机盐 蔗糖 提供碳源,维持细胞渗透压 甘氨酸、维生素、烟酸、肌醇 满足离体植物细胞在正常代谢途径受一定影响后所产生的特殊营养需求 【特别提醒】 MS培养基与微生物培养基的区别: 微生物培养基包括水、无机盐、碳源、氮源和生长因子,以有机营养为主。MS培养基则需提供大量的无机营养,尤其是植物生长所必需的大量元素和微量元素。 【对位训练】 1.月季的花药培养过程的难点之一是材料的选择,下列有关材料选择的叙述中正确的是 A.从花药来看,应当选择盛花期的花药 B.从花粉来看,应当选择小孢子四分体时期的花粉 C.从花蕾来看,应当选择略微开放的花蕾 D.从检测花粉的实验方法看,应该用显微镜观察已染色的花粉样品临时装片 解析 本题考查了花药培养中有关材料的选取方法。从花药来看,应当选择初花期的花药;从花粉来看,应当选择单核期的花粉;从花蕾来看,应当选择完全未开放的花蕾。用已染色的花粉样品制作临时装片,才能观察到细胞核的位置,以确定花粉发育的时期。 答案 D 2.(2012·东城区检测)下图表示四倍体兰花叶片通过植物组织培养形成植株的过程,相关叙述正确的是 A.②和③过程会发生减数分裂 B.①过程需生长素而③过程需细胞分裂素 C.①过程有细胞增殖但无细胞分化 D.此兰花的花药离体培养所得植株为二倍体 解析 ①是脱分化,②是再分化,①②③过程均发生的是有丝分裂;①过程需要生长素和细胞分裂素的共同调节;①过程有细胞增殖,但没有发生细胞分化;花药离体培养后得到的植株为单倍体。 答案 C 1.DNA与蛋白质在不同NaCl溶液中溶解度不同 考点二: DNA的粗提取和鉴定及PCR技术 2 mol·L-1 NaCl溶液 0.14 mol·L-1 NaCl溶液 溶解规律 DNA 溶解 析出 蛋白质 部分发生 盐析沉淀 溶解 NaCl溶液从2 mol·L-1降低过程中,溶解度逐渐增大 2.细胞内DNA复制与PCR反应的比较 比较项目 体内复制 PCR反应 解旋 在解旋酶作用下,细胞提供能量,双链部分解开 加热至90℃,双链全部解开,不需解旋酶 引物 一小段RNA 可以是RNA或单链DNA分子片段 合成子链 在引物基础上,一条链连续合成,另一条链分段合成 分别从两条链的引物端开始,都是连续合成,控制温度72℃ 特点 边解旋边复制,半保留复制 体外迅速扩增 TaqDNA聚合酶 不需要 需要 循环次数 受生物体自身控制 30多次 产物 完整DNA DNA片段 相同点 生物体内的DNA复制和PCR体外DNA扩增都需要模板、四种脱氧核苷酸,且都需要在一定的缓冲溶液中进行 3.PCR过程: ①变性 当温度上升到90℃以上时,双链DNA解旋为单链。 ②复性 温度下降到50℃左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。 ③延伸 温度上升到72℃左右,溶液中的四
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