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;;四种弱相互作用
Electrostatic interactions(静电作用)
van der Waals interactions(范德华力)--距离
Hydrogen bonds(氢键)
Hydrophobic interactions(疏水作用)
疏水作用:
水分子(极性),非极性分子相互作用,熵增。
;20 Amino Acids--侧链基团
疏水氨基酸:Glycine(甘氨酸),Alanine(丙氨酸),Proline(脯氨酸),Valine(缬氨酸),Leucine(亮氨酸),Isoleucine(异亮氨酸),Methionine(甲硫氨酸),Tryptophan(色氨酸),Phenylalanine(苯丙氨酸)
极性氨基酸:Serine(丝氨酸),Threonine(苏氨酸),Tyrosine(酪氨酸),Asparagine(天冬酰胺),Glutamine(谷氨酰胺),Cysteine(半胱氨酸)
带正电:Lysine(赖氨酸),Arginine(精氨酸),Histidine(组氨酸)
带负电:Aspartate(天冬氨酸),Glutamate(谷氨酸)
分子量最大:色氨酸
分子量最小:甘氨酸
含硫氨基酸:甲硫氨酸(蛋氨酸),半胱氨酸;蛋白质结构;氨基酸等电点计算 Isoelectric point(pI)
pH: (pK1+pK2)/2 +1 0 -1
;蛋白质变性与复性
β-巯基乙醇(还原,破坏二硫键)
变性(denature):破坏范德华力
复性(renature):活性恢复
蛋白质折叠
成核集结模型(协同cooperative) 折叠漏斗
蛋白质修饰
共价修饰(磷酸化修饰);Chapter 3 Exploring Proteins and Proteome;;免疫学手段分析蛋白
概念:抗体,抗原决定基,单克隆抗体,杂交瘤细胞
技术:ELISA(酶联免疫吸附);western blot(杂交)
indirect ELISA:检测抗体
sandwich ELISA:检测抗原
其他手段
质谱(测分子量),X衍射(晶体),NMR(溶液)
PDB数据库
测序
Edman degradation
;DNA RNA 结构与连接方式
双螺旋(磷酸二酯键 ) 茎环
半保留复制实验验证—同位素标记
概念: Tm(解旋) 引物(primer) 退火(anneal)
DNA聚合酶(纠错)
小RNA(snRNA,sRNA,siRNA,miRNA)
密码子简并性意义:降低有害突变风险
;内含子—剪接体
exon shuffling(外显子重排)
新蛋白产生;Restriction-enzyme(限制性酶)
酶切位点:回文结构 (palindromic repeat)
polymerase chain reaction(PCR)
Strand separation(变性)
Hybridization of primers(退火,annealing)
DNA synthesis(复性,延伸)
指数扩增
Gene disruption (gene knockout, 基因敲除)—研究基因功能
;Homology(同源性):
旁系同源(同一物种,不同分子) 直系同源(不同物种)
保守性取代 非保守性取代
同源性评价:替换矩阵—统计学(15~25) BLAST(序列分析)
结构同源 保守性高于 序列同源
趋异进化 趋同进化(没有同源性,进化出相同的活性中心);;Chapter 7 Hemoglobin: Portrait of a Protein in Action;Chapter 8 Enzymes: Basic Concepts and Kinetics;米氏方程的推导;Irreversible inhibitor(不可逆抑制剂) --Penicillin(青霉素)
map the active site
Reversible inhibition(可逆抑制)
Competitive inhibition(竞争性抑制):Km变大,Vmax不变
Uncompetitive inhibition(反竞争性抑制):Km变小,Vmax变小
Noncompetitive inhibition(非竞争性抑制):Km不变,Vmax变小
Suicide inhibitors:青霉素--糖肽转移酶
Catalytic antibodies:人工酶
transition-state analogs(可作抑制剂)
过渡态类似物诱导产生催化抗体
虽为人工,宛若天成
;Covalent catalysis(共价催化)
Ch
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