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(2)正常细胞与癌细胞的区别。 ①癌细胞中数目较多的细胞器: 。 ②癌细胞能无限增殖的原因: 。 提示:①线粒体、核糖体 ②癌细胞表面糖蛋白减少,无接触抑制现象 【解析】(1)与体细胞相比较,癌细胞分裂速度更快,细胞周期较小。(2)动物细胞培养时通常要在培养基中加入血清等物质,血清含有多种未知的促细胞生长因子及其他活性物质,能促进细胞的生长、增殖。(3)向培养基中通入一定浓度的CO2维持培养液的pH;(4)正常细胞铺满瓶壁时,会出现接触抑制现象,使其生长停止;因为癌细胞的遗传物质发生改变,能无限增殖,因此传代次数更多。(5)动物细胞培养过程中,应向培养液中加入适量的抗生素以防止细胞培养过程中细菌的污染。 答案:(1)较小 (2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质 (3)维持培养液的pH (4)停止 多 (5)抗生素 【总结提升】动物细胞培养的特殊条件归纳 (1)胰蛋白酶的使用:首先用胰蛋白酶处理动物的器官或组织,以制备单细胞悬液;培养过程中发生接触抑制时,同样需要用胰蛋白酶使细胞分散开。 (2)避免杂菌污染的措施:培养液及培养用具灭菌处理,加入一定量的抗生素,定期更换培养液。 (3)特殊的营养条件。 ①液体培养基。 ②加入动物血清、血浆等。 ③通入氧气以满足代谢的需要。 ④通入二氧化碳以维持培养液的pH。 【变式训练】红豆杉,又名紫杉,可从其树皮中分离出高抗癌活性的紫杉醇。下面是某同学设计的有关紫杉醇抗肿瘤实验的研究流程,请分析并回答: (1)酶X是 酶,其主要作用是? 。 (2)物质Y是 ,乙组起 作用。 (3)细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同,例如,需要 有 、 、促生长因子、无机盐、微量元 素等,通常还需要加入血清、血浆。 (4)为清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成 危害,应采取的措施是 。 (5)实验结果:若甲组 ,说明紫杉醇有 抗肿瘤作用。 【解析】据图可知,酶X是指胰蛋白酶或胶原蛋白酶,其主要作用是使肿瘤细胞分散开。Y是生理盐水,乙组为对照组。细胞体外培养所需营养物质有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。定期更换培养液的目的是清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。 答案:(1)胰蛋白(胶原蛋白) 使肿瘤细胞分散开 (2)生理盐水 对照(与紫杉醇形成对照) (3)糖(葡萄糖) 氨基酸 (4)(定期)更换培养液 (5)肿瘤细胞的数目少于乙组 蛋白质工程 【备选典例】如图为蛋白质工程操作的基本思路,请据图回答下列问题: (1)蛋白质的功能是由其结构决定的,直接决定蛋白质结构多样 性的因素有 ,从根本 上说,蛋白质的结构是由 决定的。 (2)通过⑤过程推测的mRNA中的碱基序列是否是唯一的?为什 么?? 。 (3)②③过程发生的场所分别是 、 。 (4)蛋白质工程中的目的基因一般通过 获得。 【解题指南】解答本题的关键点是: (1)依据题图内容明确蛋白质工程的基本操作流程; (2)熟悉细胞的物质和结构基础以及中心法则相关知识。 【解析】(1)蛋白质的结构多样性由组成蛋白质的氨基酸的种类、数目、排列顺序和肽链的空间结构共同决定;从根本上说,蛋白质的结构是由基因(DNA)决定的。 (2)由于一种氨基酸可能对应多种密码子,根据蛋白质的氨基酸序列推测的mRNA中的碱基序列可能有多种。 (3)肽链的合成场所为核糖体,在内质网中将多肽链初加工成具有一定空间结构的蛋白质。 (4)蛋白质工程中的目的基因的碱基序列已知,可以通过DNA合成仪进行人工合成。 (4)④利用农杆菌介导转化棉花细胞的过程中,整合到棉花细胞染色体DNA的区段是含有E6启动子和GhMnaA2基因的T-DNA,转化后的细胞再通过植物组织培养形成植物体。 (5)导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对,抑制基因的表达,使β-甘露糖苷酶不能产生,半纤维素不会降解,使棉纤维较长。 答案:(1)HindⅢ、BamHⅠ SmaⅠ (2)复制原点、终止子、标记基因等 (3)6.0 kb 12.7 kb (4)(含有E6启动子和GhMnaA2基因的)T-DNA 植物组织培养 (5)阻止β-甘露糖苷酶合成,使棉纤维更长 热点考向 2 基因工程的操作步骤? 【典例2】肺细胞中的let-7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌。研究人员利用基因工
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