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【拓展提升】 中学生物学实验的基本技术 1.玻片标本的制作技术: 凡需在显微镜下观察的生物材料,都必须制作成临时装片、切片或涂片,如质壁分离与复原实验中要制作洋葱表皮细胞的临时装片,脂肪鉴定中要制作切片。制作方法很多,如“观察植物细胞的有丝分裂”压片法:取材→解离→漂洗→染色→制片→观察。 2.解离技术和用胰蛋白酶处理动物组织技术: 前者用于植物,后者用于动物,目的都是使细胞分散开。 3.纸层析技术(如叶绿体中色素的提取和分离): 具体方法:制样液→制备滤纸条→点样液→层析→观察实验结果。 4.比色法(如生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定;DNA鉴定;淀粉、尿糖鉴定等): 是利用生物组织中的有机物与某些化学试剂相互作用,能产生颜色反应的原理,可以根据颜色反应鉴定生物组织中某些有机物的存在。 5.恒温技术如探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验: 实验室常用的恒温技术有:a.水浴、b.恒温箱。 6.研磨、过滤技术(如叶绿体色素提取): 研磨过程中加入SiO2是为了研磨充分,色素提取时加CaCO3是为了避免色素被破坏。 7.对照技术: 很多实验都要设置对照。设置对照的方法很多,有的以不处理为实验组的对照(如对组织中还原糖鉴定时留一些组织样液作为比色对照);有的以常规品种或常规浓度作为对照;有的实验是相互对照。无论哪一种对照都必须遵循单因子变量原则。 【对点巩固】 1.下列关于生物学实验操作、实验结果、实验现象及原理的描述中,正确的是( ) A.可用斐林试剂鉴定甘蔗中的蔗糖 B.可用无水乙醇或丙酮分离滤液中的色素 C.用纸层析法分离菠菜滤液中的色素时,黄色的色素带距离所画滤液细线最远 D.用蛋清液进行蛋白质鉴定实验,发现蛋白液与双缩脲试剂发生反应后会粘附在试管壁上,其原因是蛋清液稀释不够,搅拌不匀 【解析】选D。斐林试剂鉴定还原糖,蔗糖是非还原糖,故A错误。无水乙醇或丙酮可用来提取叶绿体中的色素,分离色素用层析液,故B错误。用纸层析法分离菠菜滤液中的色素时,橙黄色的色素带距离所画滤液细线最远,故C错误。蛋清液浓度过高或搅拌不匀时容易粘附在试管壁上,故D正确。 2.下面是噬菌体侵染细菌实验的部分步骤示意图,对此过程的有关叙述正确的是( ) A.选用噬菌体作为实验材料的原因之一是其成分只有蛋白质和DNA B.被35S标记的噬菌体是接种在含有35S的培养基中直接获得的 C.实验中采用搅拌和离心等手段是为了把DNA和蛋白质分离 D.在新形成的噬菌体中没有检测到35S,说明噬菌体的遗传物质是DNA而不是蛋白质 【解析】选A。B项中噬菌体是病毒,不能直接用培养基进行培养;C项中采用搅拌、离心不是把DNA和蛋白质分离,而是将吸附在细菌外的噬菌体颗粒与细菌进行分离;D项实验中没有检测到35S标记的蛋白质,但不能证明蛋白质不是遗传物质,因为蛋白质未注入细菌内部。 3.胭脂红是一种水溶性的大分子食用色素,呈红色。用无色洋葱鳞片叶表皮制备“观察细胞质壁分离及复原实验”的临时装片时,可用高浓度(质量浓度为0.075 g/mL)的胭脂红溶液作为外界溶液,观察细胞的变化。下列有关实验操作和结果的叙述,正确的是( ) A.发生细胞质壁分离现象时,表皮细胞的液泡为红色 B.发生细胞质壁分离复原现象时,表皮细胞内的无色区域变大 C.用不同浓度的胭脂红溶液处理细胞后,均能观察到质壁分离和复原现象 D.当质壁分离不能复原时,细胞仍具有正常生理功能 【解析】选B。本题的实验材料是无色洋葱鳞片叶表皮,外界溶液是红色的胭脂红溶液,由于细胞壁具有全透性,当发生质壁分离时,可见细胞膜外红色区域扩大,而无色的区域变小;发生质壁分离复原时,现象正好相反,因此B项是正确的,A项是错误的。C项中如胭脂红溶液浓度过高,可使细胞失水过多而死亡,不能再发生质壁分离复原现象。D项当质壁分离不能复原时,细胞已死亡,不具有正常生理功能。 4.生物学是一门以实验为基础的科学,实验误差是高中生做实验时经常面对的问题,如何减小实验误差是中学生必须解决的问题,请分析并回答有关问题: (1)观察植物细胞的质壁分离与复原实验:在选用的洋葱鳞片叶外表皮细胞中紫色不明显时,为便于观察,可以在蔗糖溶液中加入________。某同学用质量浓度为1.0 g·mL-1的蔗糖溶液做此实验时,质壁分离现象明显,但不能复原,检查操作步骤都正确,则造成实验失败的原因是______________。 (2)观察植物细胞的有丝分裂实验:某同学上午10时剪取洋葱根尖,按实验要求规范操作,观察到处于分裂期的细胞远少于分裂间期的细胞,你认为造成这种结果的最可能的生理原因是______________________________。 (3)向加有2 mL豆浆的试管中滴入足量的胰蛋白酶,适宜的温度下保温一段时间后,加入1 mL双缩脲试剂A液
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