2015-2016百世经典_全优课堂_第42课时概述.ppt

第42课时　微生物的培养与应用 1．培养基的类型及作用 (2)培养基的营养构成 ①各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。 ②不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 3．配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤及注意事项 (1)步骤：计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板 (2)注意事项 ①倒平板的温度一般在50 ℃左右适宜，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。 ②平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 4．纯化大肠杆菌的操作过程及注意事项 (1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 (2)方法：平板划线法、稀释涂布平板法。 ①平板划线法：平板划线法中细菌的分离和稀释过程发生在接种环在固体平板表面上的移动划线过程中。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成纯种的单个菌落。(如下图) 注意　a．划线时最后一区域不要与第一区域相连。 b．划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。 ②稀释涂布平板法 Ⅰ.系列稀释操作(图1) a．将分别盛有9 mL水的6支试管灭菌，并按101～106的顺序编号。 b．用移液管吸取1 mL培养的菌液，注入101倍稀释的试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸3次，使菌液与水充分混匀。 c．从101倍稀释的试管中吸取1 mL稀释液，注入102倍稀释的试管中，重复b步混匀操作。以此类推，直到完成最后1支试管的稀释。 注意　移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2 cm处。 注意　稀释涂布平板操作复杂，各个细节均应保证无菌。具体如下： ①酒精灯与培养皿的距离要合适； ②吸管头不要接触任何其他物体； ③吸管要在酒精灯火焰周围使用。 【拓展提升】 1．自养微生物和异养微生物的营养比较 2.划分依据：自养微生物与异养微生物类型划分的主要依据是能否以无机碳作为生长的主要或唯一碳源，而与氮源无关。自养微生物以CO2或碳酸盐为主要或唯一碳源进行代谢生长，异养微生物必须以有机物作为碳源进行代谢生长。 3．自养微生物的能源 (1)利用光能，如蓝藻等。 (2)依靠物质氧化过程中释放的能量，如硝化细菌，能利用NH3氧化过程中释放的化学能，NH3既作为氮源，又作为能源。 4．异养微生物的能源 主要来源于有机物的氧化分解，碳源不仅为异养微生物提供构成细胞的物质，而且提供完成整个生命活动所需的能量。 【对位训练】 1．下列关于细菌的叙述，正确的是(　　) A．不同种类细菌的生长均需要相同碳源 B．常用液体培养基分离获得细菌单菌落 C．细菌大量培养过程中，芽孢形成于细菌生长的调整期 D．培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选 【答案】D 【解析】本题考查培养基的成分、应用和微生物的生长和筛选。碳源是指能为微生物提供生长繁殖所需碳元素的营养物质，不同种类的微生物对碳源的需求不同，糖类是最常用的碳源，其次还有CO2、花生粉饼等，A项错误；分离细菌菌落常用固体培养基，液体培养基常用于工业化生产，B项错误；细菌培养过程中，产生芽孢是在稳定期，C项错误；高浓度NaCl可抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长，所以可以将其筛选出来，D项正确。 1．筛选菌株的原理 微生物的选择培养：在选择培养基的配方中，把尿素作为培养基中的唯一氮源，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 2．统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。 ②方法：用计数板计数。 ③缺点：不能区分死菌与活菌。 (2)间接计数法(活菌计数法) ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②操作 a．设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 b．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 ③计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。 3．细菌分离与计数的实验流程 土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物的培养→观察并记录结果→细菌计数 记录数据表格 【对位训练】 2．(2014·广州质检)下列关于微生物分离和培养的叙述，不正确的是(　　) A．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度 B．测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法 C．提纯和分离严格厌氧型微生物，一般不用稀释涂布平板法 D．分离能分解尿素的细