2015-2016高中生物专题22土壤中分解尿素的细菌的分离与计数新人教版选修1概述.ppt

生物选修1（人教版） 专题2　微生物的培养与应用　　　　　　　　　　　　 　　　　　 课题2　土壤中分解尿素的细菌 的分离与计数 要点突破 一、筛选菌株——选择培养基 1．目的 从众多的微生物中分离所需要的微生物。 2．方法 (1)在培养基中加入某种化学物质。例如，加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在培养成分的基础上加入。 栏目链接 (2)改变培养基中的营养成分。例如，缺乏氮源时可以分离固氮微生物；石油作为唯一碳源时，可以分离出能消除石油污染的微生物。 (3)改变微生物的培养条件。例如，将培养基放在高温环境中培养可以得到耐高温的微生物。 例1　本课题使用的培养基的配方如下： 栏目链接 请分析后回答： (1)在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是________和________。 (2)该培养基为____________培养基(按物理状态分)，理由是______________。 (3)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，又是如何进行选择的？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 栏目链接 解析：碳源是提供碳元素的物质，氮源是提供氮元素的物质。所以碳源是葡萄糖和尿素，氮源是尿素。该培养基的配方中含有凝固剂——琼脂，因此，配制的一定为固体培养基。绝大多数生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此这种培养基对微生物有选择作用。选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 答案：(1)葡萄糖和尿素　尿素　(2)固体　含有凝固剂琼脂　(3)有选择作用。此配方中尿素是唯一氮源，因此，只有能够利用尿素的微生物才能够生长 栏目链接 ?变式训练 1．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( ) A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂 C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂 D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂 解析：鉴定分解尿素的细菌在培养基中加酚红指示剂是最好的方法。加入二苯胺鉴定DNA，苏丹Ⅲ鉴定脂肪，双缩脲试剂鉴定蛋白质。 答案：A 二、实验过程 1．菌株计数 微生物生长量的测定有计数法、重量法、生理指标法等，但是一般使用计数法。计数法可分为直接计数法和间接计数法。二者比较如下： 栏目链接 注：①400、1 000是常数。 栏目链接 2．实验设计原则 (1)设立重复组： 统计某一稀释度下平板上的菌落数时，要至少涂布三个平板作重复组，增强实验结果的说服力与准确性。 (2)设立两种对照组： ①判断培养基中是否有杂菌污染，需将未接种的选择培养基同时进行培养。 ②判断选择培养基是否具有筛选作用，需设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目、进行对比得出结论。 栏目链接 3．实验结果分析 栏目链接 ①在设计实验时，一定要涂布至少三个平板作为重复组。 ②在分析实验结果时，一定要考虑所设置的重复组的结果是否一致，如果差别过大，则意味着操作有误，需要重新实验。 栏目链接 例2 用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是(　　) A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230 B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238 C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163 D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233 栏目链接 解析：在设计实验时，一定要涂布至少三个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性，所以A、B不正确。C项虽涂布了三个平板，但是，其中一个平板的计数结果与另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，因此，不能简单地将三个平板的计数值用来求平均值。 答案：D 栏目链接 ?变式训练 2．用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目。在某稀释浓度下某同学做了若干个平板并统计每个平板的菌落数，最接近样品中菌体数真实值的是( ) A．菌落数量最多的平板 B．菌落数量最少的平板 C．菌落数量适中的平板 D．取若干个平板菌落数量的平均值 栏目链接 解析：用稀释涂布平板法对样品中活菌数目进行统计，只是一种估测，根据此方法的实验过程可知，在某一稀释度下涂布的平板菌体数具有一定的偶