2015第七章消毒灭菌与概述.ppt

第七章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全 第一节 消毒灭菌的常用术语 常用术语 消毒 防腐 无菌和 无菌操作 灭菌 灭菌 (sterilization)： 杀灭物体上所有微生物的方法，包括全部病原微生物、非病原微生物。 消毒 (disinfection)： 杀死物体上或环境中的病原微生物，并不一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物。 防腐 (antisepsis)： 防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。 0.01％ 硫柳汞 无菌 (asepsis)： 不存在活菌，为灭菌的结果。 无菌操作 (aseptic technique)： 防止微生物进入人体或其它物品的操作技术。 第一节 消毒灭菌的方法 4 热力灭菌法 高效消毒剂 消毒灭菌法 滤过除菌法 使用化学消毒剂 中效消毒剂 低效消毒剂 物理 化学 干燥与低温抑菌法 一、 热力灭菌法 湿热灭菌法 干热灭菌法 红外线 干烤 焚烧与烧灼 巴氏消毒法 煮沸法 流动蒸汽消毒法 间歇蒸汽灭菌法 高压蒸汽灭菌法 物理消毒灭菌法 用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，以保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法。 61.1～62.8℃ 30分钟 71.7℃ 30秒 巴氏消毒法（pasteurization） 高压蒸汽灭菌法 （sterilization by pressured steam) 最有效、最常用的灭菌方法 103.4kPa，121.3 ℃ ，15～20分钟 2. 辐射杀菌法(Radiation) 紫外线 265~266nm 杀菌原理：作用于DNA，使细菌DNA相邻的胸腺嘧啶形成二聚体，干扰DNA其正常转录复制，导致细菌变异或死亡。 优势：高效率、广谱性、低成本、长寿命和无二次污染 缺点：穿透力较弱 应用： 无菌操作室、外科换药室、病房、手术室及实验室的空气和物体表面消毒； 有损伤，注意防护 电离辐射：β、γ射线：一次性医用材料 微波 紫外线 265～266nm 杀菌原理：作用于DNA，使一条DNA链上相邻两个胸腺嘧啶共价结合形成二聚体，干扰DNA转录复制。 用途与缺陷 穿透力弱 电离辐射 β、γ射线 微波 辐射灭菌 滤器： 0.22～0.45μm, 不耐热血清，空气等 三、滤过除菌法 (filtration) 玻璃滤菌器 石棉滤菌器 薄膜滤菌器 高效空气颗粒滤菌器 低温 干燥 冷冻真空干燥法 （lyophilization） 目前保存菌种的最好方法 四、干燥与低温抑菌法 常用消毒剂的杀菌机制 使菌体蛋白变性或凝固 干扰微生物酶系统和代谢 损伤细胞膜 分类 化学结构和性质 杀菌效力：高效、中效、低效 选择原则 效果好 毒力低 便宜 第二节 化学消毒灭菌法 类别 作用机制 常用种类 酚类 蛋白变性，细胞膜损伤 石炭酸、来苏 醇类 蛋白变性 乙醇 氧化剂和卤素 氧化、蛋白沉淀 高锰酸钾、过氧乙酸、碘酒 重金属盐 氧化、蛋白酶变性 氯化汞、硝酸银 表面活性剂 蛋白变性，细胞膜损伤 新洁而灭 染料 干扰氧化、抑制繁殖 龙胆紫 酸碱类 破坏膜、壁，蛋白凝固 醋酸、生石灰 烷化剂 蛋白质、核酸烷基化 环氧乙烷 消毒剂的主要种类 医疗器械物品的消毒灭菌 高危器械物品 中危器械物品 低危器械物品 快速周转的医疗器械 室内空气消毒灭菌 手和皮肤的消毒 黏膜的消毒 病人排泄物与分泌物的消毒灭菌 病人污染物品的消毒 饮水的消毒 环境的消毒 问题？ 影响消毒灭菌效果的因素 微生物的种类 微生物的物理状态 微生物的数量 消毒剂的性质、浓度与作用时间 温度 酸碱度 有机物 影响消毒灭菌效果的因素 第五节 病原微生物实验室生物安全 防范、处理危险生物因子对人体危害的综合性措施。 生物安全 (Biosafety) Ⅰ级 危害性最低、绝大部分不感染人类。（第四类） Ⅱ级 中等危害性的生物因子。能有效防治。 伤寒沙门菌、肝炎病毒、霍乱弧菌 （第三类） Ⅲ级 可能通过气溶胶感染或能导致严重后果的生物因子。可以治疗或预防。 结核分枝杆菌、炭疽芽胞杆菌 （第二类） Ⅳ级 可通过气溶胶感染的危险的或致死性的生物因子。难以治疗或预防。 天花病毒、埃博拉病毒 （第一类） 生物危害程度分级 实验室最有效、最常用的防护设施是生物安全柜 实验室的生物安全防护水平(biosafety level, BSL) BSL-1 BSL-2 BSL-3 BSL-4 实验室的生物安全防护设施 可从事高致病性病原微生物实验活动 生物恐怖威胁的分级 A级