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当F因子处于游离状态时,细菌为F+, 当整合到宿主染色体上时即为Hfr品系。 1)产生重组子的频率不同,Hfr×F-的重组子频率是10-2,而F+×F-产生的重组子仅为10-6; 2)F+×F-的后代常为F+,而Hfr×F-的后代为F-; 3) F+不能传递细菌染色体基因,Hfr可以传递。 1)都能与F-进行杂交发生重组; 2)杂交时都要通过接合管和受体菌连接; F+ 和Hfr的相同点是: F+ 和Hfr的不同点是: 6. F+ 和Hfr的关系 7. 中断杂交与染色体作图 原理:Hfr×F-杂交中染色体是定向地、均匀地、逐渐进入F-细菌的,大部分F因子并没有进入受体,随接合管断开(中断杂交)的时间不同,进入的基因也不同。 中断杂交作图 根据供体基因进入受体细胞的顺序和时间绘制连锁图的技术。 ⑴ Hfr菌株的基因是按一定的线性顺序依次进入 F﹣菌株的。 ⑵ 基因位点离原点越近,进入F﹣越早,重组机会越多;反之越晚。 ⑶ F 因子插入的位置不同,使不同的Hfr菌株有自己稳定的转移起点和次序。 习题:从A到E为源于同一大肠杆菌F+菌株的5个Hfr株,括号内的数字示中断杂交试验的5个基因进入F-受体菌所需的时间 A B C D E mal (1) ade (13) pro (3) pro (10) his(7) str(11) his(28) met(29) gal(16) gal (17) ser(16) gal(38) xyl(32) his(26) pro(23) ade(36) pro(44) mal(37) ade(41) met(49) his(51) met(70) str(47) ser(61) xyl(52) 1. 绘出F+菌株的遗传图,表明所有基因的位置,并以分钟表示基因的相对距离。 2. 指出F因子在每一Hfr菌株中插入位点和方向 3. 为得到一个最高比例的Hfr重组体,理论上接合后在受体中选择那个供体标记基因? A B C D E mal (1) ade (13) pro (3) pro (10) his(7) str (11) his (28) met(29) gal(16) gal (17) ser(16) gal (38) xyl (32) his(26) pro(23) ade(36) pro(44) mal(37) ade(41) met(49) his(51) met(70) str(47) ser(61) xyl(52) mal str ser ade his gal pro met xyl 10 5 20 15 10 6 26 3 5 A B D C E 8. 细菌重组与E.Coli染色体作图 两基因转移时间间距<2分钟时,中断杂交法的图距不够精确,应采用传统的重组作图法。 Hfr:lac+ade+(lac在5’) 举例:重组作图 例:二个基因紧密连锁: lac-(乳糖不发酵) ade-(腺嘌呤缺陷型) Hfr染色体 受体染色体 ade+ lac+ ade﹣ lac﹣ Hfr染色体 受体染色体 ade+ lac+ ade﹣ lac﹣ ade+ lac+ 两基因间无重组 ade+ lac﹣ 两基因间有重组 RF = = ade+ lac﹣ (ade+
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