检测生物组织中的糖类、脂肪、蛋白质改资料.ppt

实验原理： 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。 4) 检测的方法步骤 ①向试管内注入2mL待测组织样液。 4）检测的方法步骤 四种物质颜色反应的对比 总结： * * 还原糖 + 斐林试剂→砖红色沉淀 脂肪 + 苏丹Ⅲ→橘黄色 蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色 淀粉 + 碘→蓝色 一：检测生物组织中的还原性糖类 1）实验原理： 还原糖（葡萄糖、果糖、麦芽糖） + 斐林试剂→砖红色沉淀 2）实验材料：苹果汁或梨匀浆 3）试剂：斐林试剂 甲液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液 乙液：质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液 ②向试管内注入1mL斐林试剂（甲乙液等量混合均匀后再注入）。 ③将试管放入盛有50~65℃温水的大烧杯中加热约2min。 ④观察试管中出现的颜色变化。 5）实验现象 颜色变化： 蓝色沉淀(Cu(OH)2) 棕色沉淀 砖红色沉淀(Cu2O) 注意事项： 结论：可溶性还原糖与斐林试剂在水浴加热的过程中生成砖红色沉淀，说明组织样液中有可溶性还原糖。 斐林试剂要现用现配，要将甲液和乙液混合均匀后再使用，并进行水浴加热。 时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。 选材 切片 制片 镜检 （选取切片、染色、去浮色、制临时装片） 染色：滴2-3滴苏丹Ⅲ，染色3min;或苏丹Ⅳ,染色1min。 去浮色：滴1-2滴50%的酒精溶液 结论：圆形小颗粒呈橘黄色（或红色） 二：检测生物组织中的脂肪 三：检测生物组织中的蛋白质 3）试剂：双缩脲试剂 A液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液 B液：质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液 1）实验原理： 蛋白质 + 双缩脲→紫色 2）实验材料：鸡蛋清稀释液 ①向试管内注入2mL待测组织样液。 ②向试管内注入双缩脲试剂A液1mL ， 摇匀。（创设碱性环境） ③向试管内注入双缩脲试剂B液4滴，摇匀。 过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。 三：检测生物组织中的蛋白质 5）实验现象 结论：说明组织样液中存在蛋白质 取材：马铃薯匀浆 检测： 碘液2滴 现象： 摇匀后变成蓝色 四：检测生物组织中的淀粉 还原糖 蛋白质 淀粉 脂肪 有机物的检测 材料 试剂 颜色反应 可溶性还原糖 苹果、梨 斐林试剂 （甲液、乙液等量混合） 蓝色→棕色→砖红色沉淀 脂肪 花生 苏丹Ⅲ 橘黄色 苏丹Ⅳ 红色 蛋白质 豆浆、牛奶 双缩脲试剂 （先A液后B液） 紫色 淀粉 面粉 碘液 蓝色 斐林试剂与双缩脲试剂的比较： A液:0.1g/mLNaOH B液:0.01g/mLCuSO4 甲液:0.1g/mLNaOH 乙液:0.05g/mLCuSO4 紫色物质生成 砖红色沉淀 先加A液，再加B液，不需加热 甲液与乙液先混再用，且现配现用，需加热 蛋白质 还原性糖 试剂组成 检验结果 试剂用法 检测对象 双缩脲试剂 斐林试剂 斐林试剂 水浴加热 （50—65℃） 还原糖 （葡萄糖、果糖、麦芽糖） 生产砖红色沉淀 脂肪颗粒 苏丹Ⅲ 显微镜观察 橘黄色的脂肪颗粒 脂肪颗粒 苏丹Ⅳ 显微镜观察 红色的脂肪颗粒 蛋白质 加入双缩脲试剂 1、 2、 3、 产生紫色反应 4、斐林试剂与双缩脲试剂的用法比较