气液色谱分析资料.doc

气液色谱分析 一、色谱分类方法及分离方法的选择 1.色谱分类方法 1. 按固定相外形： 柱色谱（填充柱、空心柱《毛细管柱色谱》）、平板色谱（薄层色谱和纸色谱）。 2. 按组分在固定相上的分离机理： 吸附色谱：不同组分在固定相的吸附作用不同； 分配色谱：不同组分在固定相上的溶解能力不同； 离子交换色谱：不同组分在固定相（离子交换剂） 上的亲和力不同； 凝胶色谱（尺寸排阻色谱）不同尺寸分子在固定相上的渗透作用. 3. 按两相状态 分类 方法 固定相 平衡类型 适用 气相色谱 气液色谱 固定液吸附于惰性载体（担体） 气液间分配 小分子量气体及烃类，如大气成分分析 气体试样或能被气化的固体和液体试样 气固色谱 固体吸附剂 吸附、解吸 气相键合色谱 有机组分键合于固体表面 气体和键合体表面间的分配 液相色谱 液液色谱 固定液吸附于惰性载体 不相溶液体间的分配 高沸点、热稳定性差、相对分子质量大得有机物 液固（吸附）色谱 固体吸附剂 吸附、解吸 液相键合色谱 有机组分键合于固体表面 液体和键合体表面间的分配 离子交换色谱 离子交换树脂 离子交换 离子对色谱法 空间排阻色谱法 /凝胶渗透色谱法 液体附于多孔聚合物 分配/筛析（多孔性物质对不同大小分子的排阻作用不同） 超临界色谱 有机组分键合于固体表面 超临界流体和键合相间分配 4.HPLC液相色谱中按固定相和流动相极性大小分为：正相色谱（固定相极性大于流动相，极性小的先流出，适于极性组分分离 ）、反相色谱（固定相极性小于流动相，极性大的先流出，适于非极性组分分离） 5.GC毛细管柱气相色谱的特点： 渗透性好 可使用较长的色谱柱 相比率大 有利于提高柱效；加上保留因子k小，渗透性好，可使用很高的载气流速， 因而分析速度快 柱容量小 因而进样量小。需采用分流技术并使用更高灵敏度的检测器 总柱效高 尽管毛细管柱效比填充柱大，但仍处于同一数量级。但毛细管柱长很大，因而总柱效高，分离复杂混合物能力强 2.色谱分离方法的选择 试样分子量 水溶性、离解性 方法 流动性 物质种类 ＞2000 溶于水 排阻色谱 水 不溶于水 排阻色谱 非水 ＜2000 不溶于水 正/反相色谱 同系物 吸附色谱 异构体多功能团 排阻色谱 分子大小差异 溶于水，不解离 反相色谱 排阻色谱（小孔） 水 溶于水，可解离 阳离子交换色谱 碱 阴离子交换色谱 酸 溶于水，离子与非离子 反相离子对色谱 二、固定相 固体吸附剂、固定液+载体 1.固定液 1.1要求：a) 热稳定性好、蒸汽压低——流失少；b) 化学稳定性好——不与其它物质反应； c) 对试样各组分有合适的溶解能力（分配系数K适当）；d) 对各组分具有良好的选择性 1.2.固定液与组分的作用力：a) 色散力——非极性分子之间b) 诱导力——极性与非极性分子之间c) 取向力——极性与极性分子之间d) 氢键力——静电吸引，亦属取向力。 1.3.固定液的选择：固定液的特性参数：①相对极性0P100；② 固定液特性常数(I：罗氏常数、麦氏常数 1.4固定液选择：①按“相似相溶”原理选择固定液。 非极性组分——非极性固定液——沸点低（小分子物质）的物质先流出； 极性物质——极性固定液——极性小的物质先流出； 各类极性混合物——极性固定液——极性小的物质先流出； 氢键型物质——氢键型固定液——不易形成氢键的物质先流出； 复杂混合物——两种或以上混合固定液 极性：正己烷＜环己烷＜苯＜甲苯 ②按化学基团相似原则选择；③按组分主要性质差别选择 2.HPLC的流动相 HPLC流动相为溶剂（其极性、粘度、PH值、浓度等均可改变，可调节样品在两相间分配 的差异），它既有运载作用，又和固定相一样，参与对组分的竞争，因此溶剂的选择对 分离十分重要。理想的溶剂应有下列特性： ①对待测物具一定极性和选择性；②使用UV检测器时，溶剂要匹配 ；使用折光率检测器，溶剂的折光率要与待测物的折光率有较大差别；③高纯度。否则基线不稳或产生杂峰；④化学稳定性好；⑤适宜的粘度。粘度过高，柱压增加；过低，易产生气泡；⑥为防止固定相的流失，流动相与固定液应尽量不互溶，或者说二者的极性相差越大越好。 3.固定相（P77,70色谱法） HPLC通常按固定相的不同分为多种类型——各种色谱方法 如液液色谱法、液固色谱法、离子交换色谱法、离子对色谱法等 1、液液分配色谱——根据各待测物在互不相溶的两溶液中的溶解度不同，因而