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1 生活饮用水标准检验方法－微生物指标GB/T5750.12-2006 陕西省疾病预防控制中心 王安礼 手办公电 卫生指标菌概念及卫生微生物学检验原则 水样的采集、保存与运输要领 我国饮用水的微生物学检验及卫生标准GB/T5750.12-2006 样品的检验与报告 卫生指标菌及卫生微生物学检验原则 指标菌的概念:指标菌（或称指示菌）(indicator bacteria, or bacterial indicators）是指在常规卫生监测中，用以指示检品卫生状况及安全性的指示性微生物。 卫生指标菌及卫生微生物学检验原则 指标菌的选择标准 作为一般卫生质量和安全性评价的指标菌，依据不同的样品有不同的目的和要求，总的选择原则是易于检出，检验方法比较简单、方便、有一定的代表性等。简单说就是具有可操作性及可重复性。 卫生指标菌及卫生微生物学检验原则 GB5749—2006规定的微生物检验指标共4项常规指标：菌落总数、总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌和2项非常规指标：贾第鞭毛虫和隐孢子虫。 菌落总数（细菌总数）： 水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48h后，所得1ml水样所含菌落的总数。 水中菌落总数可作为评价水质清洁程度和考核净化效果的指标。 饮用水卫生标准规定菌落总数限值为每毫升水样不超过100CFU。 菌落总数增多说明水样已被污染，但不能说明污染来源，也不能说明该水体传播传染病的风险程度。因此，必须结合总大肠菌群来判断水质污染的来源和安全程度。 总大肠菌群： 指一群在37℃培养24h，能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。一般地说，总大肠菌群能够指示肠道传染病存在的可能性，但它不是专一的指示菌。 GB5749-2006《生活饮用水卫生标准》中 规定100毫升水样中不得检出总大肠菌群。 如果在水样中检出总大肠菌群，则应再检验大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群以证明水体是否已经受到粪便污染；如果水样中没有检出总大肠菌群，就不必再检验大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群。 总大肠菌群是评价饮用水卫生质量的重要微生物指标之一。 耐热大肠菌群（粪大肠菌群）： 是指用提高培养温度的方法将自然环 境中的大肠菌群与粪便中的大肠菌群区分开，在44.5℃仍能生长的大肠菌群。主要来源于人和温血动物粪便，是水质受粪便污染的重要指标菌。检出耐热大肠菌群表明饮水已被粪便污染，有存在肠道致病菌和寄生虫等病原体的危险。新国标规定每100毫升水样中不得检出耐热大肠菌群。 　　　 大肠埃希氏菌（Escheirique coli）：在含有荧光底物的培养基上44.5℃培养24h产生β－葡萄糖醛酸酶（β－glucuronidase）,分解荧光底物释放出荧光产物，使培养基在紫外光下产生特征荧光的细菌。 大肠埃希氏菌是粪便污染最有意义的指示菌。 新国标规定：若检出总大肠菌群，须进行大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群检测。若水样中检出大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群，说明水体可能已受到粪便污染，存在发生肠道传染病的可能性，必须采取相应措施。 水质非常规指标： 贾第鞭毛虫和隐孢子虫 他们是两种可能存在于水中或其他介质中的原虫类寄生虫。 常规指标是指能反映生活饮用水水质基本状况的水质指标，非常规指标是指根据地区、时间或特殊情况需要实施的生活饮用水水质指标。 新标准初步实现了与国际接轨。同时考虑到地区差异性，其中的“水质非常规指标及限值” 的实施项目和日期由各省省级人民政府根据当地实际情况确定，但是最迟于 2012 年 7月 1日必须实施。必威体育精装版情况是：国家要求到2015年全国省会城市106项指标实行全覆盖；在地市级城市覆盖42项常规指标。 水样的采集、保存、运输要领 1、采集水样应该特别注意无菌操作，以防杂菌污染，盛水容器在采样前必须洗刷干净，进行灭菌后备用（水样瓶容量为500ml的磨口玻塞瓶，用纸包裹后灭菌）。 水样的采集、保存、运输要领 2、在取自来水水样时，必须用清洁布将水龙头擦干，再用95%酒精烧灼消毒水龙头周围，然后把水龙头完全打开，放水5—10分钟后再将水龙头关小，采集水样。经常取水的水龙头放水1—3分钟后即可采集水样。机井水的采样与自来水相同。 水样的采集、保存、运输要领 3、取江、湖、河、水库、蓄水池、游泳池等地面水源的水样时，一般在居民常取水的地点，应先将无菌采样瓶浸入距水面10—15cm水深处，井水在离水面50cm深处，然后掀开瓶塞采集水，待水盛约4/5后将瓶塞放下塞好，从水中取出。 水样的采集、保存