北大仪器分析-紫外可见分光光度法2概述.ppt

一、 紫外可见分光光度计的主要部件 1．光源： 2．单色器：包括狭缝、准直镜、色散元件。 作用:产生单色光 续前 3．吸收池： 厚度(光程): 0.5, 1, 2, 3, 5…cm 玻璃——能吸收UV光，仅适用于可见光区 石英——不能吸收紫外光，适用于可见和紫外光区 要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致） 4．检测器： 接收透射光，将光信号转变为电信号的装置 5．记录装置：讯号处理和显示系统 分光光度计 二 紫外可见分光光度计的分类 1．单光束分光光度计 特点： 从光源到检测器只有一束单色光 使用时来回拉动吸收池→移动误差 对光源要求高 比色池配对 续前 2．双光束分光光度计： 特点：因光束几乎同时通过样品池和参比池，因此可消除光源不稳产生的误差。 不用拉动吸收池，可以减小移动误差 对光源要求不高，可以自动扫描吸收光谱 双波长光度计光路示意图 4. 分光光度计的光学性能 光学性能规格： （1 ）波长范围：能测量波长范围 （2 ）波长准确度：仪器显示的波长数值与单色光的实际波长值之间的误差 ? ? 0.5nm。 （3 ）波长重现性：重复使用同一波长，单色光实际波长变动值 ? ? 0.5nm。 （4 ）透光率测量范围：0~150%（T ） （5 ）吸光度测量范围（6 ）光度准确度 （7 ）光度重复性：同样条件下重复测量透光率的变动性 ? ? 0.5%。 （8 ）分辨率：单色器分辨两条靠近的谱线的能力。260nm处??=0.3nm （9 ）杂散光：以测光讯号较弱的波长处所含杂散光的强度百分比为指标。（200或220nm、310或340nm）220nm处NaI(1%g/ml) ? ? 0.5%。 * 一、 主要部件 二、 分光光度计的类型和光学性能 三、 仪器的校正 第二节 紫外-可见分光光度计 光源 单色器 样品池 检测器 读出系统 在UV-Vis光度计中，单色器通常置于吸收池的前面！ （可防止强光照射引起吸收池中一些物质的分解） 棱镜——对不同波长的光折射率不同 常用色散元件 分出光波长不等距 光栅—衍射和干涉，分出光波长等距 钨灯或卤钨灯——可见光源 350~1000nm 氢灯或氘灯——紫外光源 200~360nm 光电池 光电管 光电倍增管 二极管阵列检测器 原理 双光束光度计动画示意 光源 检测器 单色器 单色器 切光器 吸收池 双波长分光光度计示意图 3. 双波长分光度计 通过切光器使两束不同波长的光交替通过吸收池，测得吸光度差?A。 ?AB1和?AB2分别为在?1和?2处的背景吸收，当?1和?2 相近时，背景吸收近似相等。二式相减，得 这表明，试样溶液浓度与两个波长处的吸光光差成正比。 特点：可测多组份试样、混浊试样、而且可作成导数光谱、不需参比液(消除了由于参比池的不同和制备空白溶液等产生的误差)、克服了电源不稳而产生的误差，灵敏度高。 * *