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微生物的培养和利用讲解
基础课时案39 微生物的培养和利用 判断下列说法是否正确: 1.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源( ) 2.利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数( ) 3.消毒和灭菌实质是相同的( ) 基础回顾 一、微生物的实验室培养 1.培养基 2.无菌技术 (1)关键:防止 的入侵。 (2)不同对象的无菌操作方法[连一连] a.平板划线法:是通过 在琼脂固体培养基表面 的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 b. 法:是将菌液进行一系列的 ,然后将 的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。 (3)菌种的保存方法 ①对于频繁使用的菌种,可以采用 的方法。 ②对于需要长期保存的菌种,可以采用 的方法。 深度思考 如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,请思考 (1)获得图A效果和B效果的接种方法分别是什么? (2)某同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是什么?应当怎样操作才可避免此种现象? 提示 (1)获得效果A的接种方法为稀释涂布平板法,获得效果B的接种方法为平板划线法。 (2)最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灭菌;采取的措施是增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灭菌。 二、微生物的筛选和计数 1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (1)分离原理:土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成 ,这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起 作用。 (2)统计菌落数目:统计样品中的活菌一般用 法。 (3)实验流程:土壤取样→ →微生物的培养与观察→细菌的 。 ②筛选方法: 染色法,即通过是否产生 来筛选纤维素分解菌。 ③培养基:以 为唯一碳源的选择培养基。 ④实验流程 土壤取样:富含 的环境 ↓ 选择培养:用 培养,以增加纤维素分解菌的浓度 ↓ :制备系列稀释液 ↓ 涂布平板:将样品涂布到 的培养基上 ↓ 挑选产生 的菌落 ②鉴别培养基: 配制特点:在培养基中加入某种指示剂或化学药品,以鉴别不同种类的微生物。(即只能鉴别出你此种微生物是不是你所需要的微生物,而不能抑制其余种类的微生物生长 ) 例如:伊红美蓝培养基 (1)用途:伊红美蓝培养基一般用于检测饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌。 (2)原理:伊红为酸性染料,美篮为碱性染料。当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色,再与美蓝结合形成深紫色菌落,并带有金属光泽。 考点一 微生物的实验室培养 【典例】为了获得β-胡萝卜素产品,某小组开展了产β-胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题。 (1)实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是_______________ 为了减少灭菌后器皿被污染,灭菌前应该_______________。 (2)为了筛选出酵母菌,培养基中添加了青霉素,其目的是 ____________________。 (4)右图是灭菌锅及其局部剖面示意图,图中甲、乙、丙指示的依次是________。 (填序号) ①安全阀、放气阀、压力表 ②放气阀、安全阀、压力表 ③安全阀、放气阀、温度表 ④放气阀、安全阀、温度表 易错警示! (1)稀释涂布平板法的缺点:稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。 (2)平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同: ①第一次操作:杀死接种环上原有的微生物。 ②每次划线之前:杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。 ③划线结束后:杀死接种环上残存的菌种,避免细菌污
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