提取分离6详解.ppt

现代天然药物提取分离技术 天然有机化合物分子大小各异，分子量从几十到几百万，因此也可以根据此进行分离。 常用的有透析法、凝胶滤过法、超滤法、超速离心法等。 其中透析法、超滤法、超速离心法主要用于分离（粗分）水溶性大分子化合物，如蛋白质、核酸等，而凝胶滤过法可用于分离分子量1000以下的化合物，在此对其特点及应用作以介绍。 1. 凝胶柱的结构特点及性质 凝胶的种类及商品较多，一般为在水中不溶但可膨胀的球形颗粒、具有三维空间网状结构的多聚体。 常用的有葡聚糖凝胶（Sephadex G）类型和羟丙基葡聚糖凝胶（Sephadex LH-20）类型。此外，尚有聚丙烯酰胺凝胶（Bio－Gel P）、琼脂糖凝胶（Sepharpse； Bio－Gel A ）。 系由平均分子量一定的葡聚糖及交联剂（如环氧氯丙烷）交联聚合而成。生成的凝胶颗粒网孔大小取决于所用交联剂的数量及反应条件，并用交联度表示。 交联度越高，表明加入的交联剂越多，孔径越小，则网孔越紧密，膨胀时的吸水量也越小；反之，交联度越低，表明加入的交联剂越少，孔径越大，则网孔越稀疏，膨胀时的吸水量也越大。 所有葡聚糖凝胶材料的商品型号即按照交联度的大小分类，并用吸水量表示。如Sephadex G－25表示：G（凝胶Gel的缩写），后附数字25＝吸水量（2.5ml/g）×10。 葡聚糖凝胶（Sephadex G）类只能在水及含醇水中应用，根据不同规格的孔径不同选择运用。一般天然药物化学分子量在100－1500左右，所以所用交联度应高些如Sephadex G－10，20，25等。 为Sephadex G－25经羟丙基化处理后得到的产物，其中葡聚糖凝胶部分葡萄糖与羟丙基蒋以醚键的形式结合，从而使分子中的C链加长，脂溶性也随之有所增加。 它与Sephadex G－25相比较，突出优点是，即可以在水相中进行，又可以在有机溶剂如（氯仿或氯仿甲醇）中进行，并具有一定反相分配层析的性能。 2. 分离原理 主要是分子筛作用（略有一点反相分配色谱效果）。 分子量大的不能或难以进入到凝胶颗粒内部，故在颗粒间隙移动，一般会随溶剂先下来，而分子量小的则可以渗入扩散到凝胶颗粒内部，通过色谱柱时阻力较大，故将较晚流出，不同分子量的分子进入到颗粒内部的程度不同，所受阻力也不相同，因而流出速度也不同，据此即可将不同分子量的化合物加以分离。 3. 装柱与洗脱 4.预处理与再生处理 5. 保存：醇中保存；若长时间不用，应充分干燥后保存。 特别是Sephadex LH-20比较昂贵，应注意其 再生处理和保存！ 超滤技术：超滤技术是60年代发展起来的一种以多孔性半透膜——超滤膜作为分离介质的膜分离技术，具有分离不同分子量分子的功能。 近几年，国内外学者将其应用于中药提取液的澄清分离，效果良好，可与其他分离方法如高速离心法、醇处理法等结合用于中药液体制剂的澄清分离、提取、浓缩，而且还可用于除菌、除热源。目前该技术用于中药生产刚刚起步，试验研究较多，用于大规模生产还有待于进一步完善提高。 * 6 分 离(Ⅳ) Ⅳ.根据物质分子大小差别进行分离 所以，后附数字越大，则交联度越低。 葡聚糖凝胶（Sephadex G）类性能特点 羟丙基葡聚糖凝胶（Sephadex LH-20） *