湘雅生化PBL胰岛素的信号转导讲解.ppt

第六节 PI3K－Akt/PKB信号转导通路 （磷脂酰肌醇3激酶） 脂类分子为细胞的第二信使 一、PI－3K家族 PI-3K作用：三种同工酶 催化磷脂酰肌醇的D3羟基的磷酸化 产物： PtdIns-3，4-P2（磷脂酰肌醇3，4二磷酸） PtdIns-3，5-P2（磷脂酰肌醇3，5二磷酸） PtdIns-3，4，5-P3（磷脂酰肌醇3，4，5三磷酸）PIP3 PI-3K-1结构： 110KD(P110)催化亚基： 激酶活性：催化PIP3及PIP2产生 Ser蛋白激酶活性： P85、IRS-1上ser-p（负调节） 亚型：Ia：受Ptyr-Pr及Pro-P调节； Ib：通过Gβγ转导信号 85KD(P85)调节亚基： 含2个SH2（C末端）：与P-Tyr位点结合 inter-SH2模体：催化亚基锚定位点 SH3（N末端）：与富含Pro的靶蛋白结合 断点簇区域 PI-3K-2:C端含有C2结构域，可与磷脂结合 PI-3K-3:存在于酵母细胞 二、PIP3的靶位点 与其结合的结构域： PH结构域、SH2结构域、磷酸酪氨酸结合结构域、C2结构域、FYVE环指结构域、碱性氨基酸区域、非确定的磷酸肌醇结合结构域。 前三者与PTyr结合 C2结构域存在于PKC等信号分子内 三、PIP3调节的蛋白激酶 能调节一系列蛋白激酶的活性， 对Akt/PKB调节起关键作用 Akt/PKB： Akt：胸腺瘤分离的癌基因编码一种Ser/Thr蛋白激酶 C末端激酶结构域与PKC、PKA相似－PKB N末端由PH结构域 Akt/PKB的分子结构中： S124、T450是基本磷酸化位点 T308、S473是与活化相关的磷酸化位点 激活过程： PI－3K PI4，5P2 PIP3（结合于下PH结构域） PDK－1 Akt /PKB 转位于胞膜获催化活性 催化自身S124、T450磷酸化 PDK－1催化T308、S473磷酸化 Akt /PKB完全活化 四、Akt/PKB的下游信息流和生物学功能 Akt/PKB的靶蛋白： GSK-3β糖原合成激酶、 BAD、procaspase－9和CREB 磷酸化序列：RXRXXS/T 活化的Akt/PKB可调节基因的表达 抑制凋亡和调节细胞周期 胰岛素受体信号传递 （一）胰岛素受体结构 分布广泛，1000-300000个受体/细胞。糖蛋白α2β2 α亚基（胞外）： 具有与胰岛素特异结合部位； β亚基（跨膜）（Mw95kD，620AA） 跨膜部分为23个疏水AA构成 α螺旋。 胞浆结构域含Tyr三区： 近膜结构域(Tyr972）； Tyr激酶结构域（Tyr1158,1162,1163）： 同时具ATP结合部位（1030Lys突变，TPK活性即丧失）； C端结构域（Tyr1328,1334)：在信号传递中发挥重要作用 （二）胞内胰岛素受体底物 intracellular substrates of insulin receptor（IRS) IRS家族：IRS-1,IRS-2,IRS-3,IRS-4分子量不同 （1）结构 亲水性蛋白，高度保守，N末端具有PH结构，能特异结合磷脂及胞内其它蛋白