溶血实验和有机磷中毒讲解.ppt

红细胞渗透脆性的临床意义 预习下次实验内容 传出神经系统药物对血压和心率的影响 传出神经包括哪些 影响血压和心率因素 * * 第八次实验 红细胞渗透性和化学性溶血实验 有机磷酸酯类中毒及其抢救 实验目的 实验原理 实验步骤 实验后处理 注意事项 溶血实验 红细胞渗透脆性： 红细胞在低渗溶液中可发生破裂、解体的特性。 红细胞渗透抵抗力： 红细胞耐受一定浓度的低渗溶液而不发生破裂、 解体的能力。 最小抵抗力（RBC渗透脆性） ： 开始出现溶血的溶液浓度。 最大抵抗力：完全溶血的溶液浓度。 实验原理 红细胞的化学性溶血： 有机溶剂、酸、碱破坏红细胞膜的 疏水键和膜蛋白上的次级键，溶解膜脂 质，使膜蛋白质变性，造成红细胞溶解。 1.制备红细胞悬液 取抗凝动脉血2ml 混匀离心弃上清夜 （配平、对称放置、5min、1500r/min） 加NS洗涤2次（离心弃上清夜） NS配成30%和3%红细胞悬液 实验步骤 2.渗透性溶血试验 标记1-10号试管 依次加入不同浓度的NaCl溶液 滴入30%混悬液1-2滴，轻轻混匀 静置30min后判断各试管溶血现象 3.化学性溶血试验 标记11-14号试管 依次加入不同试剂1ml 11-NS 12-氯仿 13-HCl 14-NaOH 滴入3%混悬液2ml，轻轻混匀 静置30min后判断各试管溶血现象 4.结果判断 不溶血：上层浅黄色或白色透明 下层红色不透明 部分溶血：上层红色透明 下层红色不透明 完全溶血：管内液体完全红色透明 不溶血 部分溶血 完全溶血 1.完成表6－10、11 2.分析各处理因素对红细胞膜的影响及其 原理，写出实验报告。 实验后处理 1.红细胞渗透脆性实验为定量指标，氯化钠浓度的配制要求准确。 2.向试管中滴加红细胞混悬液时要靠近液面，轻轻滴入，以免冲击力太大使红细胞破损，造成溶血假象。 3.滴加红细胞混悬液后要轻轻摇匀，切勿剧烈震荡。静置一段时间后在光线明亮处观察。 注意事项 有机磷中毒 实验目的 实验原理 实验步骤 实验后处理 注意事项 1.家兔，称重，观察并记录其正常体症（R、 瞳孔大小、唾液分泌、肌张力、肌震颤等）。 2.造模：耳缘静脉注射3.5%敌百虫(3ml/kg)，观察并 记录各种指标的变化。 3.1.3.5排先静脉注射阿托品(1ml/kg) ，记录各指标的变化；10min后再静脉注射碘解磷定(2ml/kg) ，记录各指标的变化。 4.2.4.6排给药相反。 实验步骤 观察指标 瞳孔大小：尺测量其直径（mm） 唾液分泌：-（无） 、+（少）、++（较多）、 +++（很多） 大小便： 同上 骨骼肌活动：-（无） 、+（局部）、++（全身） +++（全身并站立不稳或瘫卧桌上） 1.完成表7-9。 2.比较不同给药顺序解救效果的差异， 分析原因，写出实验报告。 实验后处理 中毒的原理和症状 中毒的原理: 外周作用（M、N样作用） 中枢作用（先兴奋后抑制） 有机磷酸酯类为难逆性抗胆碱酯酶药 中毒的症状: 实验原理 解毒药作用原理 阿托品: 小剂量阻断M受体，大剂量阻断N1受体， 可兴奋呼吸中枢 碘解磷定: 复活胆碱酯酶 与游离的有机磷酸酯类结合 1.测量瞳孔时应注意光线强弱对瞳孔大小的影响。实验前后光源的一致性。 2.敌百虫溶液有较强的刺激性，静脉注射时要避免药物外漏。 3.事先准备好抢救工作，中毒症状明显后立即解救。 注意事项 小结 红细胞脆性增加：遗传性球形红细胞增多症，自身免疫性溶血性贫血伴球形红细胞增多者。 红细胞脆性减低：见于各型海洋性贫血，包括轻型，重型β海洋性贫血及血红蛋白增多病。缺铁性贫血，镰状红细胞贫血以及其它红细胞面积/体积比例增大情况，如肝病等。 机体胆碱能神经纤维及其受体分布 1.全部交感神经和副交感神经的节前纤维（N1-R） 2.运动神经（N2-R） 3.全部副交感神经的节后纤维（M-R） 4.极少数交感神经节后纤维（M-R） 体内乙酰胆碱(Ach)神经递质的生理作用 M样作用： 心率减慢，血压下降 支气管、胃肠道平滑肌收缩 瞳孔括约肌、睫状肌收缩（瞳孔缩小） 腺体分泌增加 N样作用： 神经节兴奋 肾上腺髓质分泌增加 骨骼肌兴奋(收缩) Ach作用的消失 Ach 胆碱 + 乙酸 胆碱酯酶 有机磷 磷酸胆碱酯酶 M样症状： HR