犬急毒、长毒观察讲解.pptx

犬急性毒性试验体征观察方法犬急毒实验记录 犬急性毒性试验 基本概念：动物一次或24小时内多次给予受试物后，一定时间内所产生的毒性反应。 意义： 阐明受试物的毒性作用和了解其毒性靶器官具有重要意义。 并为长期毒性试验的观察指标及剂量设计提供参考。 一、受试物 二、动物 三、给药途径 四、给药剂量水平 五、观察时间及指标 六、病理学检查 禁止用大动物犬、猴等测定LD50。代之以少量动物作仔细的临床观察，化验检查和病理检查。 犬常用实验方法 1近似致死剂量法（用于非啮齿类动物） 一般采用6只健康动物，犬年龄为4-6月龄。 根据小动物的毒性试验结果，受试物的化学结构和其它有关资料，估计可能引起毒性和死亡的剂量范围。按50%递增法，设计出含数个剂量的剂量序列表。 根据估计，由剂量序列表中找出可能的致死剂量范围，在此范围内，每间隔一个剂量给一只动物，测出最低致死剂量和最高非致死剂量，然后用二者之间的剂量给一只动物。如果该剂量下动物未发生死亡，则该剂量与最低致死剂量之间的范围为近似致死剂量范围；如果该剂量下动物死亡，则该剂量与最高非致死剂量间的范围为近似致死剂量范围。 2 最大给药量法；对于一些低毒的受试物可采用此法。在合理的最大给药浓度及给药体积的前提下，以允许的最大剂量单次给药或24小时内多次给药（剂量一般不超过5g/kg），观察动物出现的反应。 观察时间及指标 给药后密切观察4-6小时，之后每天观察1-2次，连续观察至少14天。以便能观察到毒性反应出现的时间及恢复时间、动物死亡时间等。 一般指标：外观、行为、对刺激的反应、分泌物、排泄物等。 动物死亡情况：时间、频死期反应等。 动物体重变化。 记录所有死亡情况，出现的症状、严重程度等。 死亡动物检查：试验过程中因濒死而处死的动物、死亡的动物均应该进行大体解剖，实验结束时仍存活的动物应进行大体解剖。 任何组织器官出现体积、颜色、质地等改变时均应记录，并进行组织病理学检查。 中枢神经及运动神经系统（自发活动减少、增加，嗜睡、翻正反射消失，舔毛，躁动，僵持，震颤，惊厥，共济失调，异常运动等。） 植物神经系统（瞳孔放大或缩小，腺体分泌增加，流涎，竖毛，共济失调，肌张力增加或减弱） 呼吸系统（鼻孔分泌物，呼吸急促、缓慢、腹式呼吸，喘息，窒息，紫绀等） 心血管系统（心动过速、过缓，血管扩张或收缩，心输出改变，心律失常等） 胃肠道系统（粪便坚硬，干燥，量少，便秘，腹泻，水样便，呕吐，恶心，干呕等） 泌尿系统（血尿，多尿） 眼睛（流泪，眼球突出，上睑下垂，血性泪液，眨眼，角膜混浊，虹膜炎，结膜炎等） 皮肤，被毛，水肿，发红，皮疹，炎症，被毛竖立，色黄等。 最小致死量（MLD）指药物在最低剂量组的一群实验动物中仅引起个别动物死亡的剂量。LD10，LD5。 最大非致死量（MNLD）指药物不引起实验动物死亡的最大剂量，LD0 近似致死量（ALD）是介于最小致死量（MLD）与最大非致死量（MNLD）之间的剂量。 观察指标 1.笼内观察项目 安静进入饲养室，逐个观察，如发现死亡，记录死亡情况，迅速剖检；濒死动物，做必要检查，并迅速剖检。①外观与被毛（立毛、脱毛）状况；②行动、发声、睡眠及活动情况；③振颤、痉挛及神经反应；④呼吸雌鼠异常；⑤体位，四肢状态（姿势）；⑥粪性状；⑦呕吐物有无、性状；⑧听觉异常；⑨食欲与摄食量；⑩条件反射、流涎、呕吐、软便等。 2.触诊及观察 （1）一手从犬颈部抬起头部，另一只手检查角膜，结膜瞳孔状态、流泪（性状）有关；鼻涕有无（性状）耳漏有无（性状）。 （2）双手打开上下颚检查牙齿、口腔黏膜、舌、口盖、延后、头色、齿色、唾液、口腔、异物。 （3）肛门外阴部周围有无污物。 （4）全身触诊观察。 ①皮肤色、外伤、淋巴结、肿瘤及皮肤状态；②肌张度；③体温异常；④心率；⑤呼吸音异常。 （5）从笼中抓出犬观察 ①四肢、指趾；②步行异常及行动；③头部为止异常。