第12章吸光光度法研究报告.ppt

第十二章 吸 光 光 度 法 概 述 概述: 例题: 第 一 节 吸光光度法的基本原理 吸光光度法的基本原理 2. 物质对光的选择性吸收----吸收曲线 吸收曲线的讨论： 3、光的吸收定律 朗伯—比耳定律数学表达式 透光度(透光率)T 2).摩尔吸光系数ε的讨论 朗伯-比耳定律的物理意义： A= ε b c 3).偏离朗伯—比耳定律的原因 （1）物理性因素 非单色光作为入射光引起的偏离 讨论: 讨论: (2) 化学性因素  第二节、光度计及其基本部件 一、基本组成 2.单色器 3. 样品室 光电管或光电倍增管。 第三节、显色反应及显色条件的选择 2、显色反应类型 3.显色剂 二、显色反应条件的选择 X+ nR == XRn 三、共存离子干扰的消除 共存离子本身有颜色或能与显色剂生成有色配合物 第四节 测定条件的选择 2. 选择合适的参比溶液 参比溶液的选择一般遵循以下原则： 第五节 吸 光 光 度 法 的 应 用 1.显色剂用量 固定待测组分的浓度、PH， 改变显色剂的浓度。 作A-CR曲线 选择曲线变化平坦处。 2.反应体系的酸度 显色剂 HR ? H+ + R- 在相同实验条件下， 作A-pH 曲线 3.显色时间与温度 实验确定 4.溶剂 一般尽量采用水相测定 1.加入掩蔽剂—— 配位、氧化还原掩蔽 选择掩蔽剂的原则： 掩蔽剂不与待测组分反应； 掩蔽剂本身及掩蔽剂与干扰组分的反应产物不干扰待测组 分的测定。 例：测定Ti4＋，可加入H3PO4掩蔽剂使Fe3+(黄色)成为 Fe(PO４)23-(无色)，消除Fe3+的干扰； 又如用铬天菁S光度法测定Al3+时，加入抗坏血酸作掩蔽剂将 Fe3+还原为Fe2+，消除Fe3+的干扰。 2.选择适当的显色反应条件 3.分离干扰离子 沉淀，离子交换，溶剂萃取 1.选择适当的入射波长 一般应该选择λmax为入射光波长。 如果λmax处有共存组分干扰时，则应考虑选择灵敏度稍低但能避免干扰的入射光波长。 为什么需要使用参比溶液？ 比色皿的反射，溶液中其他质点对光的吸收、折射等，会引起对比耳定律的偏移。 为了使光强度的减弱仅与Cx有关，需作校正。(A=0) 参比溶液的选择一般遵循以下原则： ⑴ 若仅待测组分与显色剂反应产物在测定波长处有吸收，其 它所加试剂均无吸收，用纯溶剂（水)作参比溶液； ⑵ 若显色剂或其它所加试剂在测定波长处略有吸收，而试液 本身无吸收，用“试剂空白”(不加试样溶液)作参比溶液； ⑶ 若待测试液在测定波长处有吸收，而显色剂等无吸收，则 可用“试样空白”(不加显色剂)作参比溶液； ⑷ 若显色剂、试液中其它组分在测量波长处有吸收，则可在 试液中加入适当掩蔽剂将待测组分掩蔽后再加显色剂，作为 参比溶液。 参比溶液总原则：使试液的Ax真正反映待测物Cx * * 第 一 节 概述 第 二 节 吸光光度法的基本原理 第 三 节 光度计及其基本部件 第 四 节 显色反应及显色条件的选择 第 五 节 吸光度测量条件的选择 第 六 节 吸光光度法的应用 基于物质光化学性质而建立起来的分析方法称之为光化学分析法。 光谱分析法是指在光（或其它能量）的作用下，通过测量物质产生的发射光、吸收光或散射光的波长和强度来进行分析的方法。 吸收光谱分析 (吸光光度分析法) 发射光谱分析 在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法,主要有: 红外吸收光谱：分子振动光谱，吸收光波长范围2.5?1000 ?m ,主要用于有机化合物结构鉴定。 紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围200?400 nm（近紫外区） ，可用于结构鉴定和定量分析。 可见吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围400?750 nm ，主要用于有色物质的定量分析。 本章主要讲授可见吸光光度法。 含Fe量0.001%的试样，称W试1g，仅含0.01mgFe，用1.6×10-3mol·L-1K2Cr2O7滴定,用去 VK2Cr2O7? 0.01mg=1/6 × 1.6 × 10-3 × V × Mfe VK2Cr2O7=0.02ml 滴定法误差大，