动物细胞融合与单克隆抗体(新)概述.ppt

(1) (1) (2) (3) (4) (5) 植物体细胞杂交过程示意图 A细胞 B细胞 人工诱导 1.动物细胞融合的概念 杂交细胞 动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 一、动物细胞融合 2.原理：_______________。 3.融合方法：聚乙二醇(PEG)、___________、电激等。 4.意义：突破了_____________的局限，使_________成为可能，也为制造___________开辟了新途径。 细胞膜的流动性 灭活的病毒 有性杂交方法 远缘杂交 单克隆抗体 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合，形成杂种细胞（细胞膜具有一定的流动性） 灭活的病毒诱导细胞融合的过程 比较项目 细胞融合的原理 细胞融合的方法 诱导手段 用途 植物体 细胞杂交 细胞膜的 流动性 纤维素酶、 果胶酶去除 细胞壁后诱 导原生质体 融合 离心、电 激、振动、 聚乙二醇 克服远源 杂交不亲 和，获得 杂种植株 动物细 胞融合 细胞膜的 流动性 用胰蛋白酶 使细胞分散 后诱导细胞 融合 除应用植物 细胞杂交手 段外，还有 灭活病毒 获得杂种细胞、制备 单克隆抗 体 比较动、植物细胞杂交技术 强调：效应B淋巴细胞是能够产生抗体的B淋巴细胞，下文将其简称为B淋巴细胞 抗体：能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。 能产生抗体的细胞是浆细胞（即效应B细胞）。 二、单克隆抗体 B淋巴细胞 效应B淋巴细胞 记忆B淋巴细胞 分化 抗体的传统生产方法 抗原 反复注射动物 从动物的血清中分离抗体 该法制备抗体的缺点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 制备单克隆抗体！ 二、单克隆抗体的概念 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 　 　１．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生特异性抗体。 　２．动物在免疫反应过程中，体内产生特异性抗体种类可达百万种以上，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 　３．每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。　 分析： B淋巴细胞与抗体的关系？ 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 动物细胞融合技术 单克隆抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞 2.2单克隆抗体的制备设计思路 BB 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤） （一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活 获得产生相应抗体的B细胞 （二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞 √ 体外培养 小鼠腹腔内培养 杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。 单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？ 2.3单克隆抗体的应用 诊断试剂——最广泛应用 准确、高效、简易、快速 单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。 “生物导弹” ＝单克隆抗体＋放射性同位素+化学药物或细胞毒素 借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带到癌细胞所在位置，，在原位杀死癌细胞。 治疗疾病和运载药物 主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。