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第二章 核酸(nucleic acids) 介绍核酸的分类和化学组成,重点讨论DNA和RNA的结构特征,初步认识核酸的结构特征与其功能的相关性;介绍核酸的主要理化性质和核酸研究的一般方法。 核酸的研究简史 1869年 F.Miescher 核素实际上是核蛋白 1889年 R.Altmann 核酸 A. Kossel 核酸的化学组成 1935年 Levene 提出四核苷酸假说 1944年 O.T.Avery DNA是遗传物质 1952年 A.Hershey M.Chase DNA是遗传物质 1953年 J.Watson F.Crick DNA双螺旋模型 1960s 1970s Boyer 发现了第一个EcoRⅠ 1980s 1986年 H.Dulbecco HGP 2003年 HGP全部完成 DNA分子中具有特定生物学功能的片段称为基因(gene)。 为RNA和蛋白质编码的叫做结构基因 具有调节功能的叫调节基因 一个生物体的全部DNA序列称为基因组(genome)。 基因组的大小与生物的复杂性有关,如病毒SV40的基因组大小为5.1×103bp,大肠杆菌为5.7×106bp,人为3.2×109bp。 1944年,Avery在离体条件下完成肺炎双球菌转化实验 1952年,Hershey和Chase 噬菌体感染实验 糖的命名 D.L --以C4上羟甲基在含氧环上的排布而决定的。 如果氧环上的C原子按顺时针方向旋转 羟甲基在平面之上为D-型,在平面之下为L-型 α.β--以半缩醛羟基在含氧环上的位置定的。 在D-型中,半缩醛羟基在平面之下为α型,在平面之上为β型 五元环叫“呋喃型”,六元环叫“吡喃型” (3)稀有碱基 嘌呤——次黄嘌呤、 N6N6二甲基腺嘌呤(m62A),N6-异戊基腺嘌呤 嘧啶——5-甲基胞嘧啶、二氢尿嘧啶、4-巯尿嘧啶、假尿嘧啶 都是基本碱基的化学修饰型如:甲基化,硫化,氢化等 “稀有核苷”是由“稀有碱基”所生成的核苷。 四、核苷酸 (nucleotide) 5′-磷酸核苷酸的基本结构 核苷酸 5?-核苷酸又可按其在5?位缩合的磷酸基的多少,分为一磷酸核苷(核苷酸)、二磷酸核苷和三磷酸核苷。 第三节 核酸的分子结构(掌握) 一、核酸 的一级结构 (一)定义 (二)连接方式 (三)一级结构的表示法 三、DNA的二级结构——双螺旋结构模型 DNA双螺旋结构是DNA二级结构的一种重要形式,它是Watson和Crick两位科学家于1953年提出来的一种结构模型(获1962年度诺贝尔奖)。 20世纪的三大发现之一 如何发现的,发现的依据? 依据一 Chargaff 研究小组的贡献 Chargaff规则: (1)A=T (2)G=C (一) DNA双螺旋结构模型要点 (Watson, Crick, 1953) (一) DNA双螺旋结构模型要点 (Watson, Crick, 1953) 5. 双螺旋内側的碱基,与对側碱基形成氢键互补配对(配对原则:A=T; G?C) 。 (二)DNA的双螺旋结构的意义 三种DNA双螺旋构象比较 5、三股螺旋( triplex DNAs ) DNA分子内形成三链满足的条件: 胞嘧啶质子化 具有镜像重复序列 DNA双链180度回折 双链DNA一条为嘌呤,一条是嘧啶 DNA分子间的三链结构 三股螺旋形成条件 分子间、分子内均可。 酸性条件下,胞嘧啶质子化。 形成三股螺旋的双链DNA一条为嘌呤,一条是嘧啶。 第三条链缠绕在双链DNA的大沟内,可以是嘌呤,可以是嘧啶。 四、 DNA的三级结构 当DNA双螺旋的链进一步扭曲折叠形成特定的超螺旋结构. RNA中的碱基配对原则 A-U G-C 3、mRNA的结构特点 第四节 核酸的性质一、核酸的一般性质 三、核酸的变性、复性与杂交 (一) 核酸的变性(denaturation) 1、DNA的变性: 在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两
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