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放射化学在生物技术中的应用;目录;放射性简介;放射性示踪法;DNA探针是利用同位素、生物素等标记的特定DNA片断,该片断可大至寄生虫基因组DNA,小至20个碱基。
原理:当DNA探针与待测的非标记单链DNA(或RNA)按碱基顺序互补结合时,以氢健将2条单链连接而形成标记DNA-DNA(或标记DNA-RNA)的双链杂交分子。将未配对结合的核苷酸溶解后用检测系统(放射自显影或酶检测等)检测杂交反应结果。
;这类探针多克隆在质粒载体中,可以无限繁殖,取之不尽,制备方法简便。
DNA探针不易降解(相对RNA而言),一般能有效抑制DNA酶活性。
DNA探针的标记方法较成熟,有多种方法可供选择,如缺口平移法、随机引物法、PCR标记法等,能用于同位素和非同位素标记。
;放射性免疫分析法;
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