第八章 吸光光度法概述.ppt

吸光光度法 主讲: 许辉 内蒙古农业大学理学院 8.吸光光度法 8.1: 概述 (Spectrophotometry) 8.2: 光吸收定律 8.3: 比色法和分光光度法 8.4: 显色反应及其影响因素 8.5: 光度测量误差和测量条件的选择 　一.仪器测量误差 检测计标尺上A与T的关系 若测A时产生微小的绝对差dA，则相对误差Er为：Er=dA/A；A=εbc 当b一定时，两边积分得：dA=εbdc dc为测量浓度时的绝对误差，二式相除： dA/A=dc/c=Er 因c A ，故dc亦正比dA 而测量时Er相等，上式成立。 8.6: 吸光光度法的应用 二.多组分的测定---双波长分光光度法 1.双波长光度法作用原理： 设λ1和λ2两束单色光强度相等，则有：Aλ1=ελ1bc ，Aλ2 =ε λ2 bc 所以?A=Aλ1 -Aλ2=（ε λ1 -ελ2）bc 2.应用： a.混浊试液中组分测定：试液为参比（不同波长?λ=40-60nm）消除试液中散射光的影响 b.单组分测定：配合物吸收峰为测量波长，显色剂的吸收（等吸点）为参比波长 c.两组分共存时测定：利用等吸点处A相等的特点 例11.以试剂为空白参比调T=100%，测某有色液A=1.301，假设?T=0.003，求光度测量误差Er=？ 若以T=10%为参比，示差光度法测该试液的T=？此时Er又为多少？ 解：已知T=10-A=10-1.301=0.050=5.0% 若示差法： 则： 降低10倍 例12. 锌标液CZn=0.00100mol/L和含Zn样品各测A=0.700和A=1.000，问两种溶液透射率相差多少？如果用0.00100mol/L Zn 标液作参比，试液的A=？示差法与普通光度法相比，读数标尺放大了多少倍？ 解：1. A= - lgT，则T1=10-A=10-0.700=0.200=20.0% T2=10-1.000=0.1000=10.0% 故透光率相差10.0% 2.A相对=?A=εb?C=1.000-0.700=0.300 3.A相对=0.300则T=10-0.300=0.50=50% 标尺放大倍数为： 标准溶液在两种方法里标尺扩展了5倍 例13.甲基橙C=2.0×10-4mol/L,λ=520nm,在不同pH 测得各自A值如下:求甲基橙的pKa=? pH 0.88 1.17 2.99 3.41 3.95 4.89 5.50 A 0.890 0.890 0.692 0.552 0.384 0.260 0.260 解:HIn H++In- 1.17pH4.89时 A=AHIn+AIn-=εHIn[HIn]+εIn[In-] =εHInCHInδHIn+εIn-CHInδIn- 当pH1.17时 AHIn=εHInCHIn=AHL 全部为酸贡献 当pH4.89时 AIn-=εIn-CHIn=AL 全部为共轭碱贡献 代入(1)得: 整理: A(Ka+[H+])=AHL[H+]+ALKa 故: 则: 将实验室数据代入公式(3) 当pH=2.99时: 当pH=3.41时: 当pH=3.95时: 故: 例14.某一元酸指示剂,酸型HIn在410nm有最大吸收,碱型In在645nm有最大吸收,且互不干扰.今配制浓度相同,而pH不同的该溶液,分别在两波长处测各自A值: pH1=7.70时 λ =665nm, A=0.400=A1 pH2