第二讲 植物组培的培养基.ppt

第二讲 培养基;目的要求：; 第一节 培养基的种类和成分 一、培养基种类▼ 二、培养基成分▼ 第二节 培养基制备 ▼ 一、母液配制和保存 　　　 　　　 二、培养基配制、分装和灭菌▼ 第三节 培养基的选择▼ 一、单因子试验 二、多因子试验 三、逐步增减法 四、广谱实验法;一、培养基的种类 1、根据其态相不同分为固体培养基与液体培养基。 固体培养基是指加凝固剂的培养基。 培养基中加入一定量的凝固剂，加热溶解后，分别装入常用的培养容器中冷却后即得到固体培养基。 液体培养基是指不加凝固剂的培养基。 ; 培养基种类;;; 3、根据其作用不同，培养基分为： 诱导培养基 增殖培养基 生根培养基 4、根据其营养水平不同，培养基可分为基本培养基和完全培养基。 基本培养基（就是通常称呼的培养基）主要有MS、White、 N6、B5 、改良MS、Heller、Nitsh、SH、 Miller等。 完全培养基就是基本培养基的基础上，根据试验的不同需要，附加一些物质，如生长调节物质和其他复杂有机物质等。; 常用培养基种类; ★;N6培养基特点：;White培养基特点：;B5培养基特点：;MS培养基特点： 无机盐、离子浓度高，硝酸盐含量较高。 ; 二、 培养基成分; 一、无 机 盐 ▲;二、有 机 物;碳水化合物　; 糖在培养基的作用： 1）为细胞提供合成新物质的碳骨架 2）为细胞的呼吸代谢提供底物和能量 3）维持渗透压;种类： VB1（盐酸硫胺素）、VB6（盐酸吡哆醇）、 VB3（烟酸）、Vc（抗坏血酸 浓度：0.1－1.0mg/L 　 作用：VB1　 促愈伤组织产生，提高活力 　　　VB6 促根生长　 　　 Vc 防组织褐变 VB3 与植物代谢和胚的发育有关系 ; 氨基酸：甘氨酸、精氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、 天冬酰胺、丙氨酸等等。因培养基的种类不同，其种类和浓度不同。 肌醇：又称环己六醇，在糖类的转化中起作用 ;名称;椰乳：促愈伤组织和细胞培养，用量10－20%，　　　使用注意茎尖大小 香蕉泥：用量150－ 200ml/L ，应用在兰花组培 马铃薯汁液：用量150－200g/L，使苗壮 水解酪蛋白：浓度100－200mg/L，应用在微茎尖　　　　　　培养 ; 自然界中，植物激素是植物新陈代谢中产生的天然化合物，它能以极微小的量影响到植物的细胞分化、生长、发育，影响到植物的形态建成、开花、结实、成熟、脱落、衰老和休眠、萌发等许多生理生化活动。 在培养基中，其各种成分对培养物影响最大的最显著的就是激素。激素的种类、浓度、以及配比都会显著的影响愈伤组织的形成、不定根、不定芽的分化，胚状体的形成等。 通常，不同植物，或不同品种，甚至同一植物的不同位置对激素的要求有很大的变化，这主要取决于植物的内源激素水平。 组织培养中使用的激素有的是天然的，如脱落酸（ABA）等，有的是合成的，如二氯苯氧乙酸（2，4－D）;（一）、激素的种类： 1、生长素类： 在自然界中，生长素影响茎和节间的伸长、向性、顶端优势、叶片脱落和生根等现象 在组织培养中的主要作用是：诱导细胞的分裂和根的分化，诱导愈伤组织） ; 组织培养中常用的生长素： 1 二氯苯氧乙酸（2，4－D） 2 萘乙酸（NAA） 3 吲哚乙酸（IAA） 4 吲哚－－3－丁酸（IBA） NAA、IAA、IBA被广泛用于生根，2，4－D有利于愈伤组织的诱导和生长。 IAA容易光解，注意用棕色试剂瓶保存，保存时间不要太久。 溶解方法：1M NaOH或95％酒精，以前者为