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血细胞形态学讲义 血液和骨髓瑞氏染色形态学检查法 通过分析血液和骨髓中有核细胞数量、相对构成比、形态改变,了解骨髓造血功能状态和异常改变的形态学检查方法。 形态学检查方法的价值 发现血细胞构成和形态异常 了解骨髓造血功能状态 对血液病提供确诊依据或提供重要线索 是各种血液病形态学检查的基础 形态学检查方法的局限性 不能了解骨髓结构 不能了解细胞分子生物学特性和功能 骨髓血细胞检查适应症 患者多次检查外周血有异常 患者有原因未明的肝、脾、淋巴结肿大 查明感染的原因 查明恶性肿瘤有无转移 助诊类脂质沉积病 对血液病进行鉴别诊断和疗效观察 骨髓血细胞检查禁忌症 凝血因子严重缺乏的出血性疾病,如血友病。 穿刺部位有炎症或畸形 晚期妊娠的妇女做髂骨穿刺要谨慎 内 容 第一部分 标本制作 第二部分 单个血细胞形态 第三部分 骨髓和外周血有核细胞构成比 第四部分 骨髓报告书写格式和骨髓申请单 第一部分 标 本 制 作 (一) 血液和骨髓标本的来源 部位:一般在髂前上棘或髂后上棘穿刺, 必要时行胸骨穿刺,儿童还可以选择 胫骨。 骨髓穿刺成功的标志: 抽吸骨髓时患者感锐痛,骨髓液外观 红色粘稠性、有骨髓小粒、油滴。显 微镜下见有骨髓成分(如幼红细胞、 幼粒细胞、巨核细胞、浆细胞、网状 细胞等) (二)血液和骨髓标本制作 见幻灯 (三)血液和骨髓标本瑞氏染色 选择标本:选取长短厚薄适宜的涂片 (骨髓 2张、血片2 张)进行瑞氏染色。 染色原理:瑞氏染液含美蓝和伊红两种成 分,美蓝偏碱性,与细胞内酸性 物质有亲和力(胞 浆),染成蓝色;伊 红偏酸性,与细胞内碱性物质有亲和力 (胞核),染成紫红色 浓度: 瑞氏染液:缓冲液=1:2,时间1小时 (根据细胞数,室温调整 ) (左)中间为长短合适标本(右)骨髓外观,骨髓小粒 (四)观察部位的选择 光学显微镜使用 显微镜使用注意事项 低倍镜(10倍):判断取材、涂片、染色是否满意,小粒、油滴分级;骨髓增生程度;估计小粒造血细胞面积;计数全片巨核细胞数目;寻找瘤细胞团。 油镜下(100倍):观察单个血细胞形态。 第二部分 正常血细胞形态 (一) 骨髓血细胞分化 正常情况下,在造血干细胞分化、发育、成熟的整个演变过程中,存在一定的规律性。造血干细胞逐级分化形成各系列、各阶段的骨髓血细胞,造血干、祖细胞在形态上无法鉴别,只有分化发育为各系列原始、幼稚细胞后,其形态学特征才较明显,才能辨认。 血细胞分化模式(供参考) 1-1 血细胞成熟过程规律 胞体:大—小 ( 巨核 小—大) 胞浆:细胞越幼稚,染色越深;细胞越成熟,染色 越浅淡,以胞浆染色判断有核红细胞、粒细 胞、巨核细胞成熟度。 胞浆染色:深蓝(原始)---蓝色(早幼)---浅蓝 (中幼)---粉色 颗粒变化:由无颗粒(原始)---噬天青颗粒(早 幼)---特异性颗粒(中性粒、嗜酸粒、嗜碱 粒)。 胞浆量: 有少----多 胞核: 体积:有大---小,成熟红细胞无核 染色质:细致疏松---粗糙紧密快状 核膜:不显著---显著 核仁:清楚---不清---消失 胞核与胞浆体积之比: 大----小 细胞发育成熟过程:由原始---早幼---中幼---晚幼---成熟细胞 以红细胞系统的成熟过程为例 1-2 单个血细胞观察顺序 1. 细胞大小、形状 2. 胞浆量多少、颜色、颗粒、 3. 细胞核形状、染色质结构(粗细、凝聚) 4. 核仁数目、大小。 5. 核、浆比例。 (二):各系列各阶段细胞形态 红细胞系统:临床四阶段划分(原始 红 ,早幼红,中幼红,晚 幼红) (有些学者提出六阶段划
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