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新 型 溶 栓 剂 —纳豆酶素 成员:姚廷燕、魏世强、贾俊超、汶文瑾 目前市面上治疗血栓的药物 新型溶栓剂—纳豆酶素 纳豆酶素与现有溶栓药物相比: 作用机理: 纳豆激酶的生产基本工艺流程 菌种的选育 采用酪蛋白平板初筛-摇瓶复筛的筛选策略,从日本传统食品纳豆中筛选获得高产纳豆激酶的纳豆枯草菌菌株。 摇瓶种子的制备 灌装种子的制备 发酵罐培养 纳豆激酶粗品的分离与纯化 纳豆激酶酶粉制备 取纳豆激酶粗品澄清液加入冻力220 的明胶溶液,使得酶液中的终浓度0.5%(W/V);分装在安培瓶中,每瓶0.5mL,在真空冻干机中冻干,随后冻干,即得 纳豆激酶的发展与展望 目前全球纳豆激酶生产公司分布 纳豆激酶行业成长空间 * * L/O/G/O * * L/O/G/O 目录 纳豆激酶的介绍 纳豆激酶的反应机理 纳豆激酶的生产工艺流程 纳豆激酶的发展与展望 是什么导致了这些疾病 ? 血栓 血栓是血流在心血管系统血管内面剥落处或修补处的表面所形成的小块。由不溶性纤维蛋白,沉积的血小板,积聚的白细胞和陷入的红细胞组成。 × 易导致各种出血,早期表现有瘀斑、紫癜、牙龈出血、伤口出血经久不愈甚至还会导致月经量过多等。 出血可发生在任何部位,特别是泌尿和消化道。而且还会出现双侧乳房坏死,微血管病或溶血性贫血以及大范围皮肤坏疽等。 半衰期长,给药5—7日后疗效才可稳定,维持量的足够与否观察5—7日后方能作定论。 美国Doctors Best纳豆激酶素食胶囊 中奇—纳豆激酶片 纤溶能力是血纤维蛋白溶酶的4倍以上 半衰期则长达8h 不易引起出血 对纤维蛋白选择性低 半衰期短,只有2~30min 易产生全身性出血的倾向 直接溶栓 间接溶栓 刺激血管内皮产生内源性纤溶酶原激活剂t-PA 激活肾脏产生尿激酶原,进而激活尿激酶 溶解纤维蛋白,产生小肽、氨基酸和尿激酶原 纳豆激酶 再由t-PA将纤溶酶原激活为纤溶酶 溶解纤维蛋 白 灌装种子 菌种 摇瓶种子 1 2 发酵罐培养 4 3 纳豆的激酶粗品分离与纯化 5 37℃培养18h 37℃、200r/min 培养12h 将甘油冻存菌种转接至斜面培养基 接入装有2mL 种子培养基的试管,放到恒温水浴震荡器 将该种子液2mL 转入装有100mL 种子培养基的摇瓶 37℃、200r/min 培养12h 将培养好的摇瓶种子液100mL 在火焰保护下倒入10L 种子罐中,罐中有5L培养液 转速 260r/min 温度 37℃ 空气流量 24L/min 动态 监控 将培养好的种子液5L 经过管道压入到300L罐中,发酵罐中装有200L 发酵培养基。发酵36h。 转速500r/min 温度37℃ PH:7 16 h补料 发酵液离心除菌,上清液用20%~60%饱和度的硫酸铵分级沉淀 所得沉淀用10.0mmol/L ,pH 6.4 的磷酸缓冲液溶解后,进行Sephadex G-75 凝胶层析 收集的活性部分进行 Sepharose CM Fast Flow 离子交换层析,采用梯度洗脱方法进行洗脱 所得的活性回收液中纳豆激酶的纯度很高 1998年 世界上第一代富含纳豆激酶的营养食品由日本生物科学研究所研制成功并生产上市 2001年 去除了产品中的纳豆臭味 2006年 日本生物科学研究所取得了纳豆激酶的物质与制法的日本专利 第座机电话号码号 和美国专利 US6,703,504 1980年 从事溶解血栓药物研究工作的日本心脑血管专家须见洋行博士在著名的两点半实验中发现了纳豆激酶 2007年 取得了纳豆发酵中维生素K2的回收方法专利 第座机电话号码号 现在 已经推出了第三代天然超级纳豆激酶产品 纳豆激酶协会 其他作用,如治疗高血压,处理皮毛、木纤维等 纳豆激酶的生产工艺还有代优化提高 血栓患者数量居高不下,纳豆激酶相对其他药物有良好的效果。 目前纳豆激酶产品的质量参差不齐,最终会淘汰一大部分,剩下的才有资格瓜分这个市场 * * * *
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