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1、原理: 通过致密部分(如细胞核),速度慢通过疏松部位(如细胞质),速度快 为了增加其工作距离,方便细胞培养瓶的放置,通常将光源和聚光镜装在载物台的上方,而相差物镜则在载物台的下方,这种方位与一般的光学显微镜相反,故习惯上将其称之为倒置相差显微镜。 1、荧光和荧光染料 2、荧光显微镜的工作原理 3、应用 成像反差强、检测灵敏度高 定性、定位和定量的研究组织内荧光标记物质 对活细胞内分子的动态变化进行实时观察 21三体综合症FISH诊断 (红色代表21号染色体片段基因; 绿色代表22号染色体片段基因) 原理: 当电子束透射样品时,根据标本各部位密度的不同,部分电子发生散射,只有剩余电子成像,经物镜和投射镜等放大后投射到照相底片上或荧光屏上。散射的电子不参加成像,故标本中密度大的部分成像后形成电子流量减少的暗区,相反,标本密度小的部位散射的电子少而形成明区。 由于透射电镜的电子穿透力较弱,所以观察样品需特殊制备成超薄切片(其厚度一般为50-100nm)。 通过电子束照射在标本后产生的二次电子成像,二次电子产生的多少与电子束在标本表面的投射角有关,即与样品的表面结构有关。经标本表面所发射的二次电子由探测体收集,并在那里被闪烁器转变为光信号,再经光电倍增管和放大器转变为电信号来控制荧光屏上电子束的强度,显示出 与电子束同步的扫描图像。图像为立体形象,反映了标本的表面结构。 原理: 应用:可直接观察标本表面的三维形态。 3. 高压电子显微镜(high-voltage electron microcope) 加速电压大于120kV的电镜称为高压电镜。 加速电压超过500kV的高压电镜称为超高压电镜 1、穿透力强,分辨力高,可观察10μm厚的样品。不需进行超薄切片。 2、景深大,厚样品在不同高度上的细节都能同时清楚成像在同一平面上。 3、若加上特殊信号处理系统,可以得到细胞内部的三维精细结构图像。 小 结 一、细胞的显微结构观察 掌握:分辨率、显微结构的概念;普通光镜的主要用途;熟悉:相差(倒置)显微镜、荧光显微镜的主要用途。 二、细胞的亚微结构观察 掌握:亚微结构概念;熟悉:透射电镜与扫描电镜的主要用途。 复习思考题 光学显微镜技术有哪些新发展、它们各有哪些突出优点? 为什么电子显微镜不能完全代替光学显微镜? 点击留言 * * 因发现“端粒和端粒酶保护染色体的机理”获此殊荣。 杰克·绍斯塔克(美) 卡萝尔·格雷德(美) 伊丽莎白·布莱克本 (美) 2009年 因在体外受精技术领域做出的开创性贡献获此殊荣。 爱德华兹创立的体外受精技术解决了一个重要的医学难题,即通过体外受精治疗多种不育症。 罗伯特·爱德华兹(英) 2010年 细胞生物学学习方法 一、认识细胞生物学课程的重要性。 二、明确细胞生物学的研究内容。 三、从显微、超微和分子三个层次来认识细胞的结构与功能。 四、注重课堂听课质量,每次课后及时复习、整理、理解知识点。 五、将所学过的知识关联起来,多问几个为什么。 六、紧跟学科前沿,当前热点主要有信号转导、细胞周期调控、 细胞凋亡、肿瘤细胞等。 小 结 一、细胞生物学及其研究的对象及目的 二、细胞生物学的发展历史 三、细胞生物学与医学 重点:细胞、细胞生物学的概念及细胞学说。 复习思考题 什么是细胞生物学?它与医学科学的关系如何? 细胞生物学的历史发展对我们有什么启示? §2 研究技术和方法 Techniques and Method in Cell Biology 第一节 细胞形态结构研究技术 Sec 1 Cell morphology research technology 一、细胞的显微结构观察 显微镜与分辨率 microscope and resolution 分辨率,即极限分辨率,指能够区分相近两点的最小距离。 分辨率的公式 N.A. 一、细胞的显微结构观察 显微镜与分辨率 microscope and resolution 分辨率,即极限分辨率,指能够区分相近两点的最小距离。 R光镜=0.2μm R人眼=0.07mm (70 μm) R电镜=0.2nm 普通动物细胞 d=10~20μm 最大的人类细胞 人卵 d=0.2mm 最小的细胞 支原体 d=0.1μm 显微结构(microscope structure):是指通过光学显微镜(light microscope)所观察到的细胞结构。 光学显微镜是利用光线照明,将微小物体形成放大影像的仪器。 细胞内的结构,如线粒体、中心体、核仁、高尔基复合体、染色体等,只要用染料分别对细胞的不同组
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