第六章石蜡切片技术分解.ppt

石蜡切片技术 切片技术的应用到现在已有一百年多的历史了。最早应用的只是冰冻切片，随着冰冻切片的应用和实践又进一步利用石蜡的硬度，将要检查的组织块浸渍并包埋于这种坚实的介质之中，制成了石蜡切片。后来又利用明胶，火棉胶等物质的韧性来包埋组织，制成了明胶切片和火棉胶切片。 将各种组织制成非薄的切片标本，需要经过一系列比较繁杂的过程，制作切片的主要过程有： （1）取材 （2）固定 （3）脱水 （4）包埋 （5）切片 （6）染色 （7）封固 在这七个主要过程中，又包括着若干步骤。 冰冻切片 石蜡切片 火棉胶切片 ︳ ↓ ︳ —————————— 取 材——————— ↓ 固 定 ↓ ↓ 冰 冻 ——— 冲 水 ∣ ↓ ∣ 脱 水—————— ∣ ↓ ↓ ∣ 透 明 乙醚酒精 ∣ ↓ ↓ ∣ 浸 蜡 胶液渗透 ∣ ↓ ↓ ∣ 石蜡包埋 火棉胶包埋 ↓ ↓ ↓ 冰冻切片 切 片 切 片 ↓ ↓ ↓ 染 色 染 色 染 色 ↓ ↓ ↓ 封 固 封 固 封 固 第一章 组织标本的处理 第一节 取 材 取材是制作切片程序中的首要步骤，取材不当，将直接影响病理诊断和科研工作的效果。组织标本的选用非常重要，不能随意的切取组织来制作组织切片，否则病理检验的结果是不会令人满意的。 一、取材工具： 取材刀具必须锋利。切取标本不应该挤压和揉擦，不应使用有钩镊子或血管钳等手术器械镊取标本，以免损害组织造成人为组织变化，给诊断带来困难或导致错诊，漏诊。 二、取材的注意事项： （一）大体标本 应选择病变或可疑病变的组织。必要时选取病变与正常组织交界处。切取标本的原则是求准而不是求量多，所以切取组织宜小不宜大，以不超过20x15mmx3mm为度，过大过厚会影响对标本的固定，另方面也影响切片的制作。特殊目的者应属例外。 1. 了使组织切片的结构清楚，取材要及时，组织块必须争取时间及时固定，组织的固定以愈新鲜愈好。 2. 取材时对大体标本（肉眼标本）绘制图象，进行仔细描述。包括形状、大小，硬度，颜色，病灶（或可疑病变）部位等。对所取的组织应定位编号。 3. 切取各组织块时，切勿挤压损伤，对典型或具有教学和科研价值的肉眼标本，不能因取材而对标本造成人为的“病变”。 4. 取下的组织块应尽量防止其弯曲扭转，如胃肠等组织，应先平展于草纸上粘着以后，慢慢地放入固定液中.固定液的量要充足，应为固定组织的10倍。 5. 组织采取应在正常与病灶交界之处。组织形状最好为方形或长方形状，这样有利于制片。组织厚薄要均匀。 6. 各组织块应包括各脏器的重要结构，如肾脏组织包括皮质部分和髓质部分。在有浆膜的脏器（如胃等）组织块中，要至少有一块带有浆膜。 7. 组织内的钙化病灶或骨质，应在充分固定之后进行脱钙。 组织里存有钙盐可妨碍用常规方法制作良好切片。骨组织及钙化病灶，经过固定后，必先将钙盐除去使组织软化，才能进行常规切片。如脱钙不全则切片易撕开或碎裂并损伤切片刀刃