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权利要求书 1一种壳聚糖／明胶网络支架材料，其特征在于配制0．5～10（wt）％的壳聚糖 或壳聚糖／明胶水溶液，将溶液转移至与溶液不反应且耐低温的平底容器中形成 1～10mm高度的液面，置入低温冰箱（—30℃～—70℃）中预冻8～24小时，将 培养皿移入温度为（—30℃～—40℃）的冷冻干燥机干燥室中，温度平衡后密 闭干燥室开启抽气泵，维持干燥室气压小于5000帕斯卡24～72小时，然后升至 常压后加热至40℃热烘1～3小时，即得多孔材料粗产品，以5～20％氢氧化钠 溶液洗涤该多孔基材粗产品，用去离子水清洗5～10次，再用5％戊二醛溶液50 ℃下浸泡2～5小时进行交联，常温下用2％硼氢化纳浸泡进行脱醛处理，再用 去离子水冲洗5～10次，降低冻干机温度至—40℃，将多孔基材连同培养皿一起 移入—40℃的冻干机中，抽真空至干燥室气压小于5000帕斯卡并保存8～24小 时，多孔基材取出后采用γ射线进行2～10小时，累计10～80万拉德剂量的照射 以达到灭菌，然后用聚乙烯薄膜将多孔基材密封后待用。 我没有做过这个具体的反应，不过一般来说过程是这样的：一、通过次价力，如果电荷作用、超分子作用等等先将要交联的壳聚糖或明胶吸附或结合在NP表面；二、通过交联剂交联。我觉得直接分散交联是不行的，一个是容易形成大的交联结构，另一个是可能不能在NP表面形成有效的膜或壳结构（要有一定厚度）。还有，NP的浓度与聚合物的浓度和NH2比例是影响交联的重要因素。 【求助】制备壳聚糖固定化酶 作者: zmq7325 (站内联系TA) 发布: 2009-08-08 我的制备过程大致是：采用乙酸溶解壳聚糖，之后将壳聚糖滴入成型剂（乙醇-氢氧化钠溶液)，将得到的壳聚糖微球放入戊二醛溶液中交联，反应结束洗净微球，将其再与酶偶联。有哪位大虾0. 乙酸使壳聚糖质子化，从而溶解，氢氧化钠是去质子化，壳聚糖分子间的氢键作用，戊二醛主要是交联剂的作用，交联了壳聚糖，那时候还没有酶引入，酶主要时靠吸附的，而不是共价！ 等待雨停 (站内联系TA) 壳聚糖滴入成型剂（乙醇-氢氧化钠溶液)，这个i可以让壳聚糖成型么？会不会对你实验有影响呢，比如破坏了壳聚糖的一些性质和结构之类的？ Emmar8139 (站内联系TA) 反应结束洗净微球，将其再与酶偶联???这个不加交联剂的吗？如果是用戊二醛交联是利用席夫碱反应原理吧我也是做壳聚糖固定化酶的 能指点下上面制备过程中用到基本知识，感激不尽。比如，0.乙酸为何能溶解壳聚糖，而氢氧化钠为何能使其变回固体？以后壳聚糖分子发生了什么变化?1.成型剂中乙醇会对壳聚糖的结构产生何种影响？2.戊二醛的作用是否在于使壳聚糖交联，形成网状结构，同时还将酶分子连接到微球上？3.酶是如何固定于微球上的？是依据共价，还是吸附的原理？ 关于酶与戊二醛交联剂的问题 作者: liulifangxi (站内联系TA) 发布: 2012-03-20 如题，酶用戊二醛交联后，为什么还要在氨基乙酸溶液中交联未饱和的醛基，若没有进行饱和，会对酶的活性有什么影响？ Ponyo (站内联系TA) 做FET生物传感最后把多余的醛基钝化饱和掉是因为防止非特异性结合引起噪声信号，我觉得过多的醛基存在会影响酶的活性吧，个人观点 0115402 (站内联系TA) 为了保证酶与戊二醛交联完全，酶比较贵，用量少，戊二醛便宜，都是过量使用，过量部分的醛基需要用氨基乙酸溶液中的氨基来反应掉未交联的醛基部分，防止影响气候的测量。 海角 (站内联系TA) 这纯粹是个化学问题，多余的醛基必须除去才能保持你的的纯度，很可能影响酶活性，而且醛基的反应活性很高，可能在后续的使用中造成不良效果。 liubin (站内联系TA) 戊二醛 会让酶变性所以，酶是被交联上去啦，但是 活性没有啦。 duruo (站内联系TA) 这个和酶的活性无关如果酶的活性会下降，在你交联的过程中已经下降了用氨基封端，是为了避免剩余醛基在未来的实验中参与反应，对你的后续试验有影响 【求助/交流】醛基修饰的氨基载体 （戊二醛交联） 固定化脂肪酶 没有活性（失活） 作者: yyayq (站内联系TA) 发布: 2010-09-03 虫友们好，麻烦大家给我分析下原因吧我的实验操作是纳米四氧化三铁 包覆 二氧化硅 得 Fe3O4/SiO2 洗涤 干燥；APTES 修饰Fe3O4/SiO2 得 氨基纳米载体 Fe3O4/SiO2-NH2 洗涤干燥；氨基纳米载体Fe3O4/SiO2-NH2 用10%戊二醛 修饰得