现代分离分析方法.docx

现代分离分析方法一、计算化学位移（见信纸）二、术语解释及回答1.荧光（磷光）及荧光光谱的概念，以及反映了什么意义？分子荧光光谱Fluorescence spectra 分子磷光光谱phosphorescence spectra 光致发光photoluminescence（注：荧光及磷光又称为光致发光分析，就是这个英文）荧光（磷光）激发光谱和发射光谱：（下册P240）荧光和磷光光谱均属于光致发光，所以都涉及到两种辐射跃迁过程，即激发过程和发射过程。因而也都具有两种特征光谱，即激发光谱和发射光谱。激发光谱：通过测量荧光（或磷光）体的发光通量（即强度）随激发光波长的变化而获得的光谱，称为激发光谱。它的测定方法是，通过扫描激发单色器，使不同波长的入射光照射激发荧光（磷光）体，发出的荧光（磷光）通过固定波长的发射单色器而照射到检测器上，检测器荧光（磷光）强度，最后通过记录仪记录光强度对激发光波长的关系曲线，即为激发光谱。发射光谱：通过测量荧光（或磷光）体的发光通量（强度）随发射光波长的变化而获得的光谱，成为荧光（磷光）发射光谱。其测定方法是，固定激光发光的波长，扫描发射光的波长，记录发射光强度对发射光波长的关系曲线，即为发射光谱。并且磷光发射波长比荧光长。* 荧光光谱：指的是物质吸收电磁辐射后受到激发，受激发原子或分子在去激发过程中再发射波长与激发辐射波长相同或不同的辐射。激发态-基态能量传递途径 荧光发射S1—S0：由第一激发单重态的最低振动能级回到基态各振动能级间的跃迁所产生的辐射，10-7-10-9 能量比分子吸收的能量小，波长长磷光发射：T1—S0由第一激发三重态的最低振动能级回到基态各振动能级间的跃迁所产生的辐射 ，能量比荧光发射的能量小，波长长，发光速度慢 10-4-100s 禁阻跃迁荧光激发光谱：让不同波长的激发光激发荧光物质使之发生荧光，而让荧光以固定的发射波长照射到检测器上，然后以激发光波长为横坐标，以荧光强度为纵坐标所绘制的图，即为荧光激发光谱。荧光体的发光强度随激发光波长的变化。荧光发射光谱的形状与激发光的波长无关 。荧光发射光谱：使激发光的波长和强度保持不变，而让荧光物质所发出的荧光通过发射单色器照射于检测器上，亦即进行扫描，以荧光波长为横坐标，以荧光强度为纵坐标作图，即为荧光光谱，又称荧光发射光谱。荧光体的发光强度随发射光波长的变化。2.荧光光谱的应用（内源荧光和荧光探针）（除了讲的这些别的见下册书P247）荧光探针Fluorescent probe内源荧光Endogenous fluorescence内源荧光：物质本身可以吸收紫外光并发射出荧光，我们把这种荧光称为其内源荧光。应用：内源荧光法用于鉴别细菌表征的方法和原理;详细综述了近年来该方法用于食品分析、临床检验、环境监测和防生物恐怖等领域的细菌鉴别、代谢及追踪细菌源的现状和研究进展,并对其应用前景作了展望.荧光探针:在紫外-可见-近红外区有特征荧光，并且其/doc/1097833.html荧光性质（激发和发射波长、/doc/4753188.html强度、寿命、偏振等）可随所处/doc/664795.html环境的性质，如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子. 应用：最常用于荧光免疫法中标记抗原或抗体，亦可用于表面活性剂胶束、双分子膜、蛋白质活性位点等微环境特性的探测。通常要求探针的摩尔吸光系数大，荧光量子产率高；荧光发射波长处于长波且有较大的斯托克斯位移。用于免疫分析时，与抗原或抗体的结合不应影响它们的活性。荧光光谱应用领域：特殊应用领域、有机大分子、生物大分子、精细化工（荧光染料颜料Fluorescent dyes and pibments ）、功能材料。 并且可以用于痕量分析、无机化合物分析、有机化合物分析、荧光探针等。（书下册P247）3. 一维核磁谱与二维核磁谱（基本种类）（下册P168 第一页）核磁共振：Nuclear Magnetic Resonance二维相关谱 ：COSY 2D correlation spectroscopy一维核磁谱：One-dimensional NMR spectroscopy一维核磁谱：在外磁场的作用下，核自旋磁矩与磁场相互作用而裂分为能量不同的核磁能级，吸收射频辐射后产生能级跃迁，产生核磁共振波谱（如果问核磁共振就只答这个就行）。将核磁共振一维谱中重叠在一个频率坐标上的信号分别在两个独立的坐标轴(化学位移 耦合常数等)上展开，成为了一维核磁共振谱。一维核磁共振谱分为核磁共振碳谱和核磁共振氢谱。核磁共振氢谱原理：氢原子具有磁性，如电磁波照射氢原子核，它能通过共振吸收电磁波能量，发生跃迁。用/view/124606.htm核磁共振仪可以记录到有关信号，处在不同环境中的氢原子因产生共振时吸收电磁波