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单宁酶开题报告 摘要 单宁酶是一种水解酶，能水解没食子酸单宁中的酯键和缩酚酸键，生成没食子酸和其他化合物。在酶制剂工业发达的国家，如日本、美国，单宁酶的基础理论和应用研究工作开展得较早，并已在茶饮业中取得了较好的经济效益。随着国民经济的不断发展，人们生活水平的不断提高，单宁酶得到了更广泛的应用。人们已在皮革业、饲料业、化妆品业等方面开发了单宁酶的多种用途。中国是个茶叶大国，而且可开发资源丰富，单宁酶的应用前景十分广阔。 单宁酶的性质 国外对单宁酶性质的研究相对较多，也较深入，为今后的应用研究提供了有价值的参考。 单宁酶的酶学性质 来源于不同菌种的单宁酶动力学性质稍有区别。Yamada H. 等报道的黄曲霉单宁酶活性稳定pH值范围最窄，为5. 0～5. 5另据韩国的Chae Soo-Kyu 等报道的曲霉菌种AN-11单宁酶活性稳定的pH值为5. 0～6. 5其他菌种单宁酶活性稳定pH 范围大都在3.0～8.0之间，最适pH值为4～6，热稳定范围在70～80 以下，最适反应温度为35～ 60 。日本科学家Hdeaki -4 Yamada等就底物浓度对黄曲霉的影响进行了研究，测出Km (以单宁为底物) 为0.5×10 -4mol/L; Km (以葡萄糖212没食子酸为底物) 为1.4×10mol/L；Km (以没食子酸甲酯为底物) -4为8.6×10mol/L。经6mol/L盐酸胍处理后，单宁酶将发生不可逆失活，各种金属离子以及 EDTA 对酶活性影响报道结论不一。 单宁酶的物理化学性质 纯单宁酶在紫外光区280nm 处，有一个最大吸收峰，在浓度为10% ，比色皿为1 cm×1 cm 条件下，吸光系数a为11.8，260nm处吸光度与280nm处吸光度之比为0. 51。 Sadaak i Iibuchi，Chae Soo-Kyu分别用凝胶过滤法测定出它们各自选育的菌种单宁酶相对分子质量都为200 000。O sao A dachi等分别用沉降法和电泳法测定黄曲霉单宁酶相对分子质量，分别是194 000和192 000。Chantal等测出黑曲霉LCF8单宁酶相对分子质量为186 000，其等电点在4左右。Chantal和Chae Soo-Kyu在对各自提纯的酶进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析时发现，单宁酶分子由2种亚基组成，但这个结果与Kengi Aoki对酵母单宁酶结构分析的结果有所不同。后者用同样的方法，只得到一条电泳蛋白带。 O sao A dachi等进一步研究了黄曲霉单宁酶的其他结构特性，其分子中氮含量为12.9% (凯氏定氮法)，用二硝基氟苯法测氨基末端，有2个DNP-氨基酸产物，分别为DNP-丙氨酸与DNP-精氨酸,这一结果进一步指明黄曲霉单宁酶为2种亚基组成。单宁酶另一重要特征是，它为一种糖蛋白，而不同来源的单宁酶糖含量有差异。例如，黄曲霉单宁酶糖基占总相对分子质量的25% ，糖基为