09影响酶作用的因素.ppt

【目的】 【原理】 操作一、稀释唾液的准备 二、环境因素对淀粉酶的影晌1. 温度对酶活性的影响 2. pH值对酶活性的影响 3. 激动剂、抑制剂对酶活性的影响 结果分析讨论 * 影响酶作用的因素 河南科技大学医学院 生物化学与分子生物学教研室 【目的】 观察温度、pH、激动剂和抑制剂对酶作用的影响。 【原理】 与碘呈色：兰色 紫色 红色 黄色 无色 无色 水解过程：淀粉→紫糊精→红糊精→黄糊精→无色糊精→麦芽糖、葡萄糖 酶是生物催化剂，它所催化的反应，受环境中许多因素的影响。本实验通过唾液淀粉酶对淀粉的水解作用，观察温度、pH值、激动剂和抑制剂对酶活性的影响。 唾液淀粉酶属?-淀粉酶，它能随机地水解?-1,4葡萄糖苷键，水解过程如下： 淀粉的各种水解产物与碘液反应颜色不同，依此，检查淀粉的水解程度来反映酶的活性。 【操作】 一、稀释唾液的准备 实验者首先嗽口。 含一口蒸馏水于口中，轻轻嗽动一二分钟后吐入小烧杯中。 用脱脂棉(或纱布)过滤2ml，加蒸馏水稀释至20ml，即得稀释唾液。 1. 温度对酶活性的影响 二、环境因素对淀粉酶的影晌 ⑵ 10分钟后，将三支试管一齐取出，三管中各加稀释碘液1~2滴，混匀。观察结果并说明该实验条件下淀粉酶的最适温度。 ⑴ 取试管取试管3支，按下表操作。 1~2 1~2 1~2 稀碘液 混匀，分别放在各自温度下保温约10分钟 10 10 10 1％淀粉溶液 反应温度 管号 试剂(滴) 100℃管 37℃管 0℃管 结论： 碘检结果(颜色) 20 20 20 蒸馏水 10 10 10 稀释唾液 10 10 10 pH6.8缓冲液 2. pH值对酶活性的影响 ⑴ 取试管3支，编号(pH5.0、pH6.8、pH8.0)，按下表操作。 ⑵ 取白瓷板一个，预先加一排碘液,每孔一滴，每间隔1~2分钟从pH6.8管中吸一滴反应液，检测与碘反应。当试液与碘反应呈淡棕红色时，取出所有试管，各加稀碘液2滴，观察结果并说明淀粉酶在实验条件下的最适pH值。 20 20 20 蒸馏水 1~2 1~2 1~2 稀碘液 放在37℃水浴箱中保温一定时间 反应pH值 管号 试剂(滴) pH8.0管 pH6.8管 pH 5.0管 结论： 碘检结果(颜色) 10 10 10 1％淀粉溶液 10 10 10 稀释唾液 10 10 10 缓冲液 3. 激动剂、抑制剂对酶活性的影响 ⑴ 取试管取试管5支，按下表操作。 ⑵ 混匀，置37℃水浴中保温。每隔1~2分钟从有NaCl的管中取出一滴反应液与白瓷板上的碘液反应，当试液与碘反应呈淡红褐色时，取出所有试管，各加碘液2滴。混匀，观察结果并解释哪种离子是淀粉酶的激动剂，哪种离子是淀粉酶的抑制剂。 结论： 碘检结果(颜色) 放在37℃水浴箱中保温一定时间 10 10 10 10 10 1%淀粉溶液 — 10 — — — 蒸馏水 — — 10 — — 1% Na2SO4 5 — — 10 — 1% CuSO4 5 — — — 10 1% NaCl 15 15 15 15 15 稀释唾液 5号管 4号管 3号管 2号管 1号管 试剂(滴) 【结果分析讨论】 再见