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CK-MB检测 1检测目的、原理 目的：检测患者体内CK-MB 的含量，辅助临床治疗诊断。 原理：Access CK-MB检测采用双位点酶免法检测 (“双抗体夹心法”)。样品、标记了碱性磷酸酶的大鼠抗人CK-MB抗体（酶结合物）以及包被了大鼠抗CK-BB抗体的磁性颗粒被一起加入到反应管中，样品中的CK-MB和固相在磁性颗粒表面的CK-BB抗体的B亚单位（与CK-BB 和 CK-MB为同分异构体）抗原结合点进行反应，同时酶结合物特异性的与血清或血浆中的CK-MB相结合（不与CK-BB 和 CK-MB同分异构体反应）。孵育后，反应管被传送到磁性分离区域进行多次冲洗，去处未和固相结合的其它成分。最后在反应管中加入化学发光底物（Lumi-Phos* 530）, 已与固相结合的碱性磷酸酶会使该底物发出光子并被光电比色计所检测。最后，对照仪器中储存的多点定标曲线中所描述的光量子与标准品CK-MB的对应关系而计算出样品中的CK-MB浓度，反应产生的光子与样品中CK-MB的含量成正比。 2方法性能参数 不精密度：小于等于8% 分析灵敏度：小于0.1ng/ml 3样本采集及处理 A.血清或肝素抗凝血浆是推荐的样品。 B.遵循国家委员会制定的临床实验室标准推荐的以下标本处理、运行和储存步骤： 用真空采样管采集所有血液标本时须遵守常规注意事项。 离心前使标本完全自然形成凝块。 全程保证样品管的密闭状态。 离心获得血清后的两小时内，至少将500 ?l血清或血浆转移到一个密闭的储存试管中备用。 储存样品，保持样品管完全密闭，在室温(15 到 30°C)条件下不超过8小时。 如果8小时内不能完成检测即应将标本放入2 到 8°C冰箱冷藏。 如果24小时内不能完成检测即应将标本放入-20°C冰箱冻藏。 8. 标本只能复融一次。 C.样品中至多含有35mg/L (3.5mg/dl) 的胆红素、50 U/mL的肝素和脂血标本中含有相当于6g/L (600mg/ml)的甘油三脂及溶血标本含有最多5mg/ml(500mg/Dl)的血红蛋白外不影响CK-MB检测的结果。避免使用严重溶血、黄疸或有絮状物沉淀的标本。 4检测系统 Beckman Coulter, Inc. 4300 S. Harbor Blvd. Fullerton, CA 92834 U.S.A. A.R1: Access CK-MB 试剂盒 货号33300: 100 个测试， 2 盒， 50 测试/盒 现成可用，在2到 10°C冰箱中顶端朝上存放，可一直保存到标签中注明的失效期。试剂盒必须在2到 10°C冰箱保存2小时后才能放入仪器中使用或在仪器中保存。试剂盒被吸取使用后，在2 到10°C条件下可稳定28天，一旦发现有试剂盒上弹性体破裂或质控结果超出范围等现象出现即代表试剂盒失效。 1.R1a: 包被了大鼠抗人CK-BB的单克隆抗体的磁性颗粒悬浮于Tris 缓冲液中，含小牛血清白蛋白(BSA)， 0.1% 的叠氮钠和0.1% ProClin** 300。 2.R1b: 大鼠抗人CK-MB单抗-碱性磷酸酶酶结合物包含于Tris 缓冲盐中，含小牛血清白蛋白(BSA)， 0.1% 的叠氮钠和0.1% ProClin** 300。 3.R1c: 纯化的大鼠 IgG 包含于PBS缓冲液中，含 0.1% 的叠氮钠。 5 系统校准 Access CK-MB定标品 货号 33335: 2.0 mL/瓶. 定量检测的定标是用已知分析浓度的标本进行检测以观察光量子值。光量子值和已知浓度之间的数学关系就构成了定标曲线。定标曲线储存于仪器中，可将样本检测中得到的光量子值转化成特定的分析浓度。 现成可用，在2~10℃环境下保存可稳定到定标品瓶标签上标出的失效期。避免产生气泡，质控结果落 到允许的范围之外或定标品不能完全溶解是定标品失效的信号。 定标操作步骤请参见Access免疫分析系统的操作SOP。 1.S0: 以小牛血清白蛋白(BSA)为基质的缓冲液，含0.025% Cosmocil*** CQ和 0.1% 的叠氮钠。含有的CK-MB浓度为0.0ng/ml。 2.S1, S2, S3, S4, S5: 人重组CK-MB的浓度分别为3, 10, 30, 100 以及 300 ng/mL (μg/L)，包含于以小牛血清白蛋白(BSA)为基质的缓冲液，含0.025% Cosmocil*** CQ和 0.1% 的叠氮钠缓冲液中，参见定标卡和瓶贴上的准确标值。 3.定标卡：1张 4.定标周期：28天。 6检验程序 详见Access仪器系统操作SOP 7质量控制 商用质