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水稻实验报告 - 实验报告 - 书业网
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篇一:水稻愈伤组织的诱导实验报告
水稻愈伤组织的诱导
一、实验目的
1、掌握外植体的消毒方法和接种技术;
2、了解愈伤组织诱导的过程。
二、实验原理
以植物器官、组织、细胞等作外植体进行离体培养时,在一定的诱导培养条件下都能诱导形成愈伤组织。愈伤再经分化培养,通过器官发生途径或体细胞胚胎发生途径可再生成植株。
外植体源自自然环境均为带菌状态,在接种前都必须进行消毒。对于难消毒的材料,有时要几种消毒剂配合使用;对于多茸毛表面粗糙不平的材料,要加展著剂(吐温20)以增强消毒效果。
三、实验材料与用具
1、材料:水稻成熟种子(用于诱导愈伤组织);
2、试剂:75%酒精,2% NaCLO,无菌水(每组1瓶400mL);
3、培养基:诱导培养基:NB+2,4-D 2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L(pH5.8);
4、仪器设备:培养室、超净工作台、培养皿(¢9cm)2个、枪形镊、量筒(100mL)2个、三角瓶(50mL、无菌)2个、废液缸、保鲜膜、标签纸。
四、实验步骤
1、接种室、培养基及用具表面消毒
用75%酒精棉球试擦超净工作台、镊子,将培养基及用具放工作台,打开紫外灯,照射20分钟以表面消毒。之后关紫外灯,打开工作台风机,通风30分钟后可进行无菌操作。
2、种子去壳
选取饱满、无霉变、成熟的水稻种子,手工脱去谷壳(注意保持胚完整),每人准备30粒去壳种子,并按照分组放到三角瓶中。
3、操作者双手的清洗与消毒
在进入无菌室之前,各操作者先用自来水清洗干净双手并晾干,然后进入无菌室,坐在超净台前位子上后,用含75%酒精的酒精喷壶喷洒双手对双手进行消毒,在超净台风口待双手酒精风干后进入超净工作台。(注意:酒精喷壶喷洒双手时切记不要把酒精喷到超净台的有机玻璃板上!)
4、超净台面的表面消毒(以下工作在超净工作台内进行)
用枪形镊子从含75%酒精棉球的容器中取一团棉球,仔细把整个超净台面擦试一遍,尽量降低超净台面的带菌量,并将废棉球丢到废液缸中,然后点亮超净台里面放置的酒精灯。
5、外植体消毒(分组操作,每组由一位代表操作完成外植体的消毒工作)将脱谷壳米粒转到一50mL无菌三角瓶→加适量无菌水洗一次(以没过种子为准,下同)→弃水,倒入75%酒精适量,摇动搅拌,放置30秒(过程中适当轻摇动混匀)→弃酒精→加适量无菌水洗一次→弃水→倒入适量2% NaCLO,不时摇动搅拌,共处理30分钟→弃NaCLO→用无菌水洗3次,每次停留1分钟→倒去无菌水,将种子从三角瓶转到带无菌滤纸的无菌培养皿中吸干。
6、接种与观察
将吸干的消毒种子用无菌的镊子接入培养基并均匀放置,每皿接10粒,每人共接种2皿。接种完成后,将培养皿盖上并用保鲜膜封口,然后将接种有材料的培养皿移出超净台,贴上标签写明日期、接种人,按照班级统一放入一篮子,再将篮子放入培养室进行25暗培养。注意每隔2-3天前来观察一次实验现象,1周后调查计算污染率,14天后调查计算愈伤组织诱导率。
污染的种子数 ×100% 污染率(%)= 接种的总种子数
形成愈伤组织的种子数
诱导率 (%)= 100%
接种的总种子数
五、实验结果
本次实验我组未出现被污染的种子,污染率均为0 。说明实验过程中,我组成员操作规范,保证所接种的种子均不受到污染。
最后,我组的2个培养皿分别可以诱导出7和8株水稻苗,诱导率分别为70%
和80% 。
六、 讨论与分析
1、本实验出现污染的原因分析。
1)外植体消毒不彻底,表面有较多微生物残留;
2)实验用具如镊子等消毒不彻底,在操作过程中把微生物带到种子上,
污染种子;
3)实验前,超净工作台没有充分消毒,台内(主要是空气中)还残留有
较多微生物;
4)培养皿密封措施做得不好,致使培养期间有微生物进入到培养皿中,
并生长繁殖。
2、降低实验中的污染率的方法。
1)外植体、实验用具、超净工作台均需彻底消毒;
2)做好密封措施;
3)操作时勿离酒精灯太远;
4)尽量缩短操作时间;
5)定时更换消毒液(75%酒精、2% NaCLO)。
3、分析与愈伤组织诱导形成有关的因素。
1)外植体的状态(分化的程度);
2)诱导培养的环境(光线、水分、温度等);
3)植物激素的作用。
篇二:水稻品种栽培试验结果报告
水稻品种栽培试验
文章摘要:针对目前潢川县的水稻种植状况,进一步明确水稻种植的施肥技术,了解不同水稻品种不同生长期的主要病虫害以及发生情况,采取科学的病害、虫害、草害防治。打破传统模式的粗放种植模式,采取先进的测土配方施肥、科学的病虫害防治及配套的水肥管理。通过本次试验,了解部分主推品种在当地的生长表现与病虫的发生情
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