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4、同种异型抗原 同一种属不同个体之间的不同抗原。如人类的ABO、Rh血型抗原、HLA等。5、自身抗原 隐蔽的自身抗原与自身免疫系统隔绝的组织受到外伤等因素而暴露,如:脑组织、精子外伤暴露。被修饰的自身抗原自身组织在理化、生物等作用下结构发生改变,如:变性的IgG。 一﹑概 述 Ab:是由抗原刺激B 淋巴细胞转化为浆细胞后所产生,并能与相应抗原特异性结合、具有免疫功能的球蛋白,也称为抗体(antibody,Ab)。 二、Ig的基本结构 1、基本结构:由两条相同的重链和两条相同的轻链通过二硫键连接而成的四肽链结构。 抗体的立体模型 2、免疫球蛋白的功能区 VH和VL:与抗原特异性结合的部位; CL和CH1:某些同种异型Ig遗传标记; IgG的CH2、IgM的CH3: 补体C1q结合点 激活补体经典途径; CH3/CH4 结合不同细胞表面FcR 不同生物学效应。 1、IgG 血清含量最多;半衰期最长; 出生后3个月开始合成,3-5岁接近成人水平; 是唯一能通过胎盘的Ig,发挥自然被动免疫功能; 具有活化补体经典途径的能力(IgG3IgG1IgG2); 具有调理作用、ADCC作用。 是主要的抗感染抗体,具有抗菌、中和病毒和中和毒素的作用; 2、IgM 为五聚体,分子量最大,称为巨球蛋白; 个体发育中最先出现的Ig,胚胎晚期即能产生,脐带血IgM增高提示胎内感染(如风疹病毒、巨细胞病毒感染等); 抗原刺激机体时,是体内最先产生的Ig;血清IgM升高说明有近期感染; 有强大激活补体能力,在机体免疫防御的早期中具有重要作用。 3、IgA 有单体的血清型和分泌型IgA; 分泌型IgA是机体粘膜局部抗感染免疫的重要因素(呼吸道和消化道); 初乳中的sIgA可对婴幼儿发挥自然被动免疫作用。 4、IgE 属亲细胞抗体,可与肥大细胞、嗜碱性粒细胞表面FcεR结合,介导I型超敏反应; 是血清中含量最低的Ig; 主要由呼吸道、胃肠道粘膜固有层的浆细胞产生。 5、IgD 血清中含量低,其生物学作用尚不清楚; SmIgD可作为B细胞分化成熟标记,成熟B细胞同时表达SmIgM和SmIgD。 4﹑免疫球蛋白的生物学活性 (1)特异性结合抗原 (2)激活补体 (3)通过与细胞FcR结合发挥生物效应: (4)选择性传递 IgG通过胎盘;sIgA穿过粘膜的功能 (5)具有免疫原性 第一节 概述 抗原-抗体反应包括沉淀反应、凝集反应、溶解反应、补体结合反应和中和反应等。 抗原-抗体反应可用已知的特异性抗体检测未知的抗原;也可用已知的抗原检测未知的抗体。 免疫荧光技术、免疫酶技术、同位素标记技术、发光免疫分析等免疫标记技术提高了抗原抗体反应的敏感性。 二﹑抗原-抗体反应受多种因素影响 1 电解质:抗原-抗体反应通常应用0.85%的氯化钠作为稀释液 ,以供给适应浓度的电解质。 2 温度:一般常使用反应在37度水浴 或孵育箱中进行。 3.酸碱度:抗原-抗体反应适应的酸碱度 为PH6--8。 4.抗原抗体比例 第二节 抗原抗体的检测方法 凝集反应 沉淀反应 补体溶血反应和补体结合反应 中和反应 用标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应 一.凝集反应 (Agglutination) 细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集 现象,称为凝聚反应。 (1)、直接凝集:将细菌或红细胞与相应的抗体直接反应,出现细菌凝集或红细胞凝集现象。又分为玻片法和试管法。 (2)、间接凝集:将可溶性抗原包被在红细胞或乳胶颗粒表面,与相应抗体反应出现颗粒凝集现象。 三.免疫标记技术 用荧光素、同位素或酶等示踪物质 标记抗体(或抗原)进行抗原-抗体反应。标记物质与抗体(或抗原)的化学连接未改变抗体(或抗原)的免疫学特性,同时标记物的性质依然存在,因而极大的提高了反应的灵敏度,可以对微量物质进行定量、定性或定位检测。免疫标记技术主要有四种基本类型:免疫荧光技术、免疫胶体金标记技术、免疫酶技术和同位素标记技术。 1.免疫荧光显微技术 用荧光素(常用的有异硫氰酸荧光素),与抗体连接成荧光抗体,再与待测标本的抗原反应,置荧光显微镜下观察,抗原抗体复合物散发出荧光,借此对标本中的抗原作鉴定和定位。 包括直接荧光法、间接荧光法和补体法。 2.免疫荧光测定技术 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合,用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体,但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用,所以人们习惯称为荧光抗体技术,或称为免疫荧光技术
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