第十一章 植物基因工程.ppt

A 高等植物的遗传学特征 B 高等植物基因工程的基本概念 C 高等植物的基因转移系统 D 高等植物的基因表达系统 D 高等植物的基因表达系统 E 利用植物转基因技术研究基因的表达调控 F 利用转基因植物生产功能蛋白和工业原料 F 利用转基因植物生产功能蛋白和工业原料 G 植物转基因技术在植物品种改良中的应用 外源基因的四环素诱导系统 Tc-off型四环素阻遏系统 CaMV 35S P Plant nos t tTA融合蛋白 tetR tTA激活因子表达盒 CaMV 35S P Plant nos t 荧光蛋白编码基因 GFP 四环素阻遏型报告基因表达盒 tet VP16 外源基因的四环素诱导系统 Tc-off型四环素阻遏系统 CaMV 35S P Plant nos t 荧光蛋白编码基因 GFP tet CaMV 35S P Plant nos t 荧光蛋白编码基因 GFP tet 四环素 外源基因的乙醇诱导系统 CaMV 35S P Plant nos t AlcR 巢曲霉菌 alcR 转录激活因子表达盒 CaMV 35S P Plant nos t 氯霉素乙酰转移酶基因 CAT 乙醇诱导型报告基因表达盒 alcA 启动子控制区 alcA 巢曲霉菌乙醇降解酶编码基因 外源基因的乙醇诱导系统 CaMV 35S P Plant nos t AlcR 巢曲霉菌 alcR 转录激活因子表达盒 CaMV 35S P Plant nos t 氯霉素乙酰转移酶基因 CAT 乙醇诱导型报告基因表达盒 乙醇 氯霉素抗性 外源基因的地塞米松诱导系统 CaMV 35S P Plant nos t tTA融合蛋白 Yeast Gal4 tTA激活因子表达盒 Plant P Plant nos t 荧光蛋白编码基因 GFP 地塞米松诱导型报告基因表达盒 Gal4 结合区 VP16 地塞米松诱导系统 Rat GR 酵母转录因子Gal4 大鼠激素受体蛋白 单纯疱疹病毒转录激活因子 外源基因的地塞米松诱导系统 CaMV 35S P Plant nos t tTA融合蛋白 Yeast Gal4 VP16 地塞米松诱导系统 Rat GR Plant P Plant nos t 荧光蛋白编码基因 GFP Gal4 结合区 地塞米松 外源基因的地塞米松诱导系统 35S P pAcos t VP16 地塞米松诱导型四环素抑制型系统 GR tetR NLS pA35S t GUS 35S P tet 显色反应 tetR tet 结合蛋白 NLS 核定位信号序列 GR 激素受体蛋白 VP16 转录激活因子 GUS b-葡糖醛酸糖苷酶报告基因 四环素 地塞米松 外源基因的类固醇诱导系统 PG10-90 E9 t hER 雌激素诱导型的外源基因表达系统 lexA VP16 nos t hpt MCS lexA 细菌 lexA 基因的 DNA 结合区 VP16 病毒转录激活因子编码区 MCS 外源基因多克隆位点 hER 人雌激素受体编码区 hpt 潮霉素抗性基因 雌激素 PNOS lexA O - 35S P 3A t XVE转录激活因子表达盒 潮霉素标记基因表达盒 外源基因表达盒 lexA O LexA蛋白结合位点 外源基因的类固醇诱导系统 蜕皮激素诱导型的外源基因表达系统 35S P nos t HEcR LBD GR DBD GRact VP16 GUS 35S P nos t GRE 融合转录因子 显色反应 蜕皮激素 GRact 激素受体转录激活区 GR DBD 激素受体DNA结合区 HEcR LBD 昆虫激 素受体的配体结合区 9 高等植物基因工程 利用报告基因展示高等植物基因表达与调控的信息谱 利用病毒载体探查植物基因重排 利用转座元件克隆植物基因 利用T-DNA构建植物遗传突变株 利用报告基因展示高等植物基因表达与调控的信息谱 T P b-葡糖醛酸糖苷酶报告基因 GUS 应答调控元件 转录调控因子 卤代葡萄糖醛苷酸 X-gluc 蓝色化合物 荧光素酶报告基因 GFP 发射荧光 昆虫荧光素 利用病毒载体探查植物基因重排 植物基因组 报告基因 ori Apr 病毒载体 利用转座元件克隆植物基因 植物基因组 Ac 克隆 以Ac序列为探针杂交筛选 利用T-DNA构建植物遗传突变株 植物突变株基因组 LB 酶切 连接 克隆 RB NTPII pBR322 卸下克隆的植物基因片段 重组克隆DNA 植物突变基因的DNA片段 杂交野生型植物基因组 基因序列分析 经历突变的野生型全长基因 9 高等植物基因工程 利用植物生物反应器生产医用蛋白 利用植物生物反应器生产食品或饲料添加剂