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血液样本采集和血涂片制备 血液组成：血液由血细胞（红细胞、白细胞、血小板）和血浆组成 血液的生理功能：具有运输功能、协调功能、维护机体内环境稳定和防御功能。 抗凝剂的选择 乙二胺四乙酸（EDTA）盐 能与血液中钙离子结合成螯合物，使钙离子失去凝血作用，阻止血液凝固 草酸盐 常用草酸钠、草酸钾、草酸铵，溶解后的草酸根例子能与样本中的钙离子形成草酸钙沉淀，是钙离子失去凝血作用，阻止血液凝固。草酸盐对凝血因子V的保护作用差，影响凝血酶原时间测定，而且草酸盐与钙离子结合后形成的沉淀物，影响自动凝血仪检测结果，因此，草酸盐不适用于凝血检查 肝素 加强抗凝血酶（AT）灭活丝氨酸蛋白酶作用，阻止凝血酶的形成，并组织血小板凝集等作用，从而阻止血液凝固 枸橼酸盐 能与能与血液中钙离子结合成螯合物，使钙离子失去凝血作用，阻止血液凝固 血液涂片的制备 新载玻片常带有游离碱质，必须用1mol/LHCl浸泡24h，清水冲洗，干燥后备用 血液细胞染色 瑞士染色法 瑞士染料：酸性染料伊红（E-）和碱性染料亚甲蓝（M+）组成。将适量伊红、没蓝溶解在甲醇中，即为瑞士燃料。甲醇的作用：溶解没蓝和伊红；固定细胞形态 染色原理：既有物理吸附作用，又有化学的亲和作用 吉母萨染色法 染色原理：有天青、伊红组成 瑞士染色法是最经典最常用的染色法，尤其对于细胞质成分、中性颗粒等可获得很好的染色效果，但对细胞核的着色能力略差。吉母萨染色对细胞核、寄生虫赵瑟较好，结构更清晰，对对细胞质成分的着色能力略差。采用瑞士-吉母萨复合然也可使细胞质、颗粒、胞核均获得满意的染色效果。 质量控制 血涂片制备：制备涂片时，血滴愈大、角度愈大、推片速度愉快，血膜愈厚，繁殖则愈薄。血细胞比容增高、血液黏度较高时，应采用小血滴、小角度、慢推，可得满意结果；血细胞比容减低、血液较稀时，应采用大血滴、大角度、快推 血液细胞染色：染色深浅与血涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、PH值密切相关 红细胞检查 红细胞计数 检测原理： 参考值：成年男性（4-5.5）*10*12/L，成年女性（3.5-5.0）*10*12/L；新生儿（6-7）*10*12/L； 医学决定水平：高于6.8*10*12/L，应采取治疗措施；地狱参考值低限，为诊断贫血界限，低于1.5*10*12/L，应考虑输血 临床意义： 二、血红蛋白测定 检测原理： HICN测定法原理：血液中除硫化血红蛋白（SHb）外的各种Hb均可被高铁氰化钾氧化呈高铁血红蛋白，再和CN-结合生成稳定的棕红色复合物—氰化高铁血红蛋白，其在540nm处有一吸收峰，用分光光度计测定该处的吸光度，经换算即可得到每升血液中的血红蛋白度，再通过制备的标准曲线查得血红蛋白浓度 SDS测定法原理： 参考值：男性120-170g/L；女性110-150g/L 红细胞形态检查 检测原理：将细胞分布均匀的血涂片进行染色（如瑞士染色）后，根据各种细胞核成分各自的呈色特点，在显微镜下进行观察和识别 参考值：瑞士染色血图片成熟红细胞形态为双凹圆盘形，细胞大小一致，平均直径为7.2um，淡粉红色，中央1/3为生理性淡然区，胞质内无异常结构。 临床意义： （1）红细胞大小改变 小红细胞：直径6un的红细胞。正常人偶见，见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、遗传性球形细胞增多症 大红细胞：直径10um的红细胞。见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血恶性贫血 巨红细胞：直径15um的红细胞。见于叶酸和维生素B12缺乏所致的巨幼细胞性贫血 红细胞大小不均：红细胞间直径相差一倍以上。见于严重的增生性贫血如巨幼细胞性贫血 细胞内血红蛋白含量改变 正常色素性：见于正常人、急性失血、再生障碍性贫血和白血病 低色素性：红细胞中央生理性浅染区扩大，称为环形红细胞。见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、鉄幼粒细胞性贫血、某些血红蛋白病 高色素性：红细胞中央浅染区消失，整个红细胞染成红色，胞体增大，平均红细胞血红蛋白含量增高，平均血红蛋白浓度正常。见于巨幼细胞性贫血 红细胞形态改变 血细胞比容测定（Hct） 参考值：温氏法：男性0.4-0.5；女性0.37-0.48 微量法：男性 0.47±0.04，女性0.42±0.05 红细胞平均指数 检测原理：红细胞平均指数包括红细胞平均体积（MCV），每个红细胞平均体积大小，以飞升(fl)为单位；红细胞平均血红蛋白含量（MCH），每个红细胞内平均所含血红蛋白量，以皮克pg为单位；红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC），平均每升血红细胞中所含的血红蛋白浓度，以g/L为单位 MCV=Hct/RBC 80-100 MCH=Hb/RBC 26-34 MCHC=Hb/Hct 320-360 红细胞体积分布宽带（RDW） 检测原理：红细胞体积分